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       【摘要】 
       目的探讨生姜油预防日本血吸虫尾蚴感染的效果以及对皮肤的毒副作用。 方法将实验小鼠随机分为A、B、C 3组，先将生姜油涂抹于A、B组小鼠皮肤， A组小鼠直接用血吸虫尾蚴感染，B组小鼠用泥浆水洗擦后感染血吸虫尾蚴，C组为对照组，A、B两组结果与对照组比较，观察生姜油预防血吸虫尾蚴感染的效果。另以生姜油涂于小鼠腹部, 观察对皮肤的毒副作用。结果A组小鼠血吸虫尾蚴的感染率为0，减虫率达100%； B组小鼠感染率为10%，减虫率达88.5%；两组结果与对照组比较血吸虫尾蚴感染率差异均有显著统计学意义（P＜0.001）。小鼠皮肤涂生姜油后未见异常反应。结论生姜油涂肤有防御日本血吸虫感染的作用；对皮肤无明显毒副作用。
       【关键词】  生姜油； 日本血吸虫； 尾蚴； 小鼠
       Preventive Effect of Ginger Oil against the Infection Caused by Schistosoma japonicum cercariae
       BIAN Zangli， XIA Peng，HUANG Boqing，JIN Luping，LI Qiao
       （ Medical School of Yangtze River University , Jingzhou 434000,China）
       Abstract：ObjectiveTo investigate the preventive effects of Ginger oil against the infection caused by Schistosoma japonicum cercariae and its toxic and side effects to skin. MethodsThe mice were divided into Ginger oil group (group A), muddy water group (group B) and control group (group C) at random. Ginger oil was besmeared on the skin of mice and then the mice were either directly infected with Schistosoma japonicum cercariae (group A) or with the Schistosoma japonicum cercariae after washed by muddy water (group B). Meanwhile, Ginger oil was besmeared on the abdomen of mice to observe its toxic and side effects to skin. ResultsNone was infected in the Ginger oil group, the infection percentage of the muddy water group was 10%, and the rates of worm reduction were 100% and 88.5%, respectively. There were significant differences among the Ginger oil group, the muddy water group and the conorol group （P＜0.001）. In addition, no obvious injury was observed on the skin of mice when treated with Ginger oil. ConclusionGinger oil has  significant protective effect against infection caused by Schistosoma japonicum cercariae with little toxic and side effect.
       Key words：Ginger oil;   Schistosoma japonicum;   Cercariae;  Mice
       
       生姜是姜科姜属植物姜Zingiber offzcinale Rosc 的根茎，生姜油是从姜根茎中提取出来的挥发性油分，具有浓郁的芳香气味,主要用于食品及饮料的加香调味,也是药用原料［1，2］。我们已报道生姜油对日本血吸虫尾蚴有较好的杀灭效果［3］。为了进一步了解生姜油的有关作用，本实验对生姜油预防日本血吸虫尾蚴感染的效果以及对皮肤的毒副作用进行了研究。
       1  材料
       
       生姜油由芜湖杉杉生物技术有限公司提供，采用超临界二氧化碳萃取，为棕红色油状液体。生姜油相对密度（20/200C）0.925，折光系数（200C）1.499。10% 水合氯醛，天津市福晨化学试剂厂出品。尾蚴，由江苏省血吸虫病防治研究所提供阳性钉螺，实验当日逸放日本血吸虫尾蚴。小鼠，昆明种小鼠,3月龄，鼠重20～24 g，雌雄各半，由本学院动物实验中心提供。
       2  方法
       2.1  防御日本血吸虫尾蚴感染实验  将实验鼠随机分成3组：直接涂抹生姜油未清洗感染组（A组）、涂抹生姜油清洗感染组（B组）、涂抹脱氯清水感染对照组（C组）,每组12只小鼠。
       2.1.1  脱毛与麻醉  实验前小鼠腹部剃毛（范围2 cm×3 cm）；皮下注射10%水合氯醛0.1 ml进行麻醉。
       2.1.2  涂抹生姜油  将生姜油涂抹在已麻醉的A组和B组小鼠腹部脱毛皮肤上,仅涂1次。 C组小鼠腹部皮肤涂抹脱氯清水1次。
       2.1.3  清洗 B组小鼠在涂生姜油10 min后，用毛笔蘸泥浆水洗擦涂生姜油部位约8次，再用清水洗擦1次，然后用纱布擦干。
       2.1.4  感染  取日本血吸虫尾蚴（40±5）条，贴于A，B，C 3组小鼠腹部,感染20 min。重复实验1次。40 d后解剖小鼠, 用灌注法加撕碎法收集虫体。首先经上腔静脉灌注冲洗，解剖镜下计数其肝、肠静脉丛内的虫体数；灌洗结束，取下肝、肠，用小镊子将肝与肠系膜拉碎，检查、计数未冲出的虫体，计算小鼠感染率、平均虫荷数以及减虫率。减虫率计算公式为：
       
       减虫率（%）=对照组虫荷数－实验组虫荷数对照组虫荷数×100%      
       2.2  皮肤毒副作用实验
       2.2.1  皮肤急性毒副作用实验  将24只腹部剃毛小鼠归笼观察24～48   h，检查皮肤有无损伤、红肿、皮疹等，无异常者开始涂抹生姜油与蒸馏水（对照组），每组12只，涂抹3次/d，仅涂1 d，每天观察腹部皮肤有无不良反应，观察活动、饮食、粪便有无异常或死亡，连续观察7 d后剖杀；取腹壁涂生姜油部位皮肤组织切片及主要脏器(心、肝、肾、肠)的组织切片，观察组织结构的变化。
       2.2.2  皮肤慢性毒副作用实验  将24只腹部剃毛小鼠归笼观察24～48 h，皮肤检查无异常者涂抹生姜油与蒸馏水（对照组），每组12只，涂抹1次/d，连续涂15 d，观察方法同急性毒副作用实验。
       3  结果
       3.1  防御日本血吸虫尾蚴感染的实验结果小鼠腹部皮肤涂抹生姜油A组对日本血吸虫尾蚴的感染率为0，减虫率达100%；B组感染率为10%，减虫率达88.5%。A组结果与C组比较血吸虫尾蚴感染率差异有显著统计学意义, χ2值34,P﹤0.001；B组结果与C组比较血吸虫尾蚴感染率差异也有显著统计学意义χ2值26.3,P﹤0.001；而 A组结果与B组比较血吸虫尾蚴感染率差异无统计学意义，χ2值0.58，P﹥0.05。结果见表1。
       3.2  皮肤毒副作用实验观察结果皮肤急性毒副作用实验与慢性毒副作用实验观察，小鼠腹腔皮肤无损伤、红肿、皮疹等异常反应；其活动、饮食、粪便均正常；小鼠健康活泼无死亡；皮肤、心、肝、肾、肠的组织切片观察，组织结构正常；与蒸馏水涂抹对照组小鼠比较无异常。
       表1  生姜油防御日本血吸虫尾蚴感染的实验结果  （略） 
       4  讨论
       
       日本血吸虫生长过程中唯有尾蚴能主动钻入人和动物皮肤或黏膜而导致感染,因此防止尾蚴侵入皮肤即可防止血吸虫感染。使用涂肤防护剂是防止血吸虫感染的有效手段之一，研究、寻找有效的防护剂已成为预防血吸虫感染的重要课题。国内曾筛选研制了多种预防尾蚴感染的药物［4，5］，均有良好的防护作用，但或多或少地存在一些缺点，不易被群众所接受［6］。为了适应实际预防工作需要,研发新的防尾蚴感染剂很有必要。
       
       生姜油的主要成分为姜醇、姜烯、姜烯酮等，具有抗氧化、抑菌、抗凝血及防血栓、调节血脂和防治动脉粥样硬化、健胃止呕、保肝利胆、消炎、镇痛、活血祛寒、避腥臭等作用。我们曾研究报道生姜油有较好的杀灭日本血吸虫尾蚴的作用，在20s内可迅速杀死血吸虫尾蚴，已杀灭的血吸虫尾蚴对实验动物无感染性［3］。本次实验研究结果显示小鼠涂抹生姜油可以防御日本血吸虫尾蚴的感染, 直接涂抹生姜油的小鼠血吸虫尾蚴感染率为0，减虫率达100%；对涂抹生姜油清洗的小鼠其感染率为10%，减虫率达88.5%，说明涂抹的生姜油在该条件下清洗时，不易洗掉，大多仍保留在皮肤上有抵抗日本血吸虫尾蚴的感染作用。直接涂抹生姜油组与涂抹生姜油清洗组结果比较血吸虫尾蚴感染率差异无统计学意义P﹥0.05，而两组结果与对照组比较血吸虫尾蚴感染率差异均有显著统计学意义（P＜0.001），提示生姜油对预防日本血吸虫尾蚴感染有较好的作用，可明显降低感染率和减虫率。生姜油对预防血吸虫尾蚴感染的作用，可能与挥发油中的姜醇、姜烯、姜烯酮等化学成分有关，其详细机制还有待进一步探讨。有报道用生姜油涂抹关节皮肤可以治疗类风湿性关节炎等疾病［7］。该实验将生姜油涂抹于小鼠腹部皮肤未见异常反应，表明生姜油对小鼠无明显的毒副作用，可用于皮肤。本实验结果为进一步进行动物现场预防效果研究以及研制新的防尾蚴感染剂提供了实验依据。
       【参考文献】
         　　［1］ 葛毅强，倪元颖，张振华，等.生姜精油的研究新进展［J］.中国调味品，2004，9：9.
       
       ［2］ 何文珊，严玉霞，郭宝江.生姜的化学成分及生物活性研究概况［J］.中药材，2001，24（5）：376.
       
       ［3］ 边藏丽，黄柏青，丁义玲，等.生姜油杀灭日本血吸虫尾蚴的实验研究［J］.时珍国医国药，2007，18 （5）：1058.
       
       ［4］ 杨明瑾，漏磊君，严晓岚，等.左旋咪唑防御日本血吸虫尾蚴感染的实验研究［J］.中国血吸虫病防治杂志，2004，16（6）：436.
       
       ［5］ 严晓岚，杨明瑾，漏磊君，等.长效涂肤剂“防蚴灵”预防血吸虫尾蚴感染的研究［J］.中国血吸虫病防治杂志，2003，15（2）：135.
       
       ［6］ 黄轶昕，高智慧，蔡 刚，等.防蚴润肤霜防御日本血吸虫尾蚴感染的研究［J］.寄生虫病与感染性疾病，2003，1（1）：22.
       
       ［7］ 周孟清 .生姜提取物的抗菌作用及应用［J］.饲料世界，2006，1：27.