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       【摘要】 
       目的观察小鼠灌胃和吸入复方苍术油后的急性毒性反应及死亡情况。方法小鼠通过灌胃和静式染毒柜小鼠吸入接触给药，观察小鼠口服和吸入复方苍术油急性毒性。结果吸入染毒实验过程中，小鼠均出现自发活动减少、静卧、嗜睡等症状。灌胃给药3.5 h后出现小鼠死亡，大多发生于给药后24 h 以内。恢复期小鼠无异常表现。结论小鼠口服和吸入复方苍术油后，其急性毒性较低。
       【关键词】  复方苍术油 急性毒性 小鼠
       苍术为菊科植物苍术Atractylodes lancea (Thumb.)DC的干燥根茎。具有燥湿健脾、祛风散寒、明目之功效。临床上用于湿滞中焦证、风湿痹证及外感风寒挟湿之表证的治疗。复方苍术油（Fu-Fang  -Cang -Shu Oil)为含苍术、广藿香、艾叶、石菖蒲、樟树叶、艾纳香等多种挥发性中药，按中药复方配伍原则组方而成的复方制剂，所含挥发油气味芳香，具有消毒抑菌、净化空气之功效。高英［1］用超临界流体萃取（SFE）技术提取的苍术油，所含的苍术素约15%（质量分数）。按《中药新药审批办法》的规定，有效成分或其有效部位之和应达到50%以上。目前，尚没有关于复方苍术油对小鼠口服和吸入急性毒性研究的报道，因此，本实验观察复方苍术油对小鼠的口服和吸入急性毒性，为临床合理用药提供实验依据。
       1  器材
       1.1  动物NIH小鼠120只，SPF级，体重18～22g，雌雄各半，由广东省医学实验动物中心提供，合格证书：SCXK（粤）2003-0002，粤监证字2007A004。实验前适应性饲养3 d（温度24～26℃，湿度60%～70%）。
       1.2  试药与仪器复方苍术油由广州中医药大学新药中心提供，每毫升相当于67.08 g生药量，批号20070911。HOPE-MED 8050-3 型染毒柜(60L)， 合普机电工程(天津)有限公司生产。金龙鱼调和油(稀释药液用)：南海油脂工业（赤湾）有限公司生产，批号20070726。
       2  方法
       2.1  吸入急性毒性的研究［2］将60只NIH 小鼠随机分为6组（溶剂对照组及复方苍术油1，2，3，4，5五个实验组），每组10只，雌雄各半。将各组小鼠分别置于0.06 m3玻璃染毒柜内，根据预试验结果，以组间距0.6倍数设置系列染毒浓度，即分别为111 800.0，67 080.0，40 248.0，24 148.8，14 489.3 g/m3调节电加热器为80℃加热挥发，静式吸入2 h；对照组染毒柜不加复方苍术油。染毒后连续观察14 d，观察小鼠中毒的表现，记录死亡时间和死亡数，对死亡动物及时进行尸检，其它动物在观察期结束之后进行尸检，观察内脏器官体积、颜色及质地有无改变，若有肉眼可见病变进行病理组织学检查。结果表明采用新药统计软件（NDST，5.1版本）处理，用Bliss法计算LC50及95%的可信限。
       2.2  口服给药急性毒性的研究［3］将60只NIH小鼠随机分为6组同“2.1”项，每组10只，雌雄各半，给药途径为灌胃给药，给药量均为20 ml/kg 。复方苍术油1组予66.7%复方苍术油，相当于生药量894.8 g/kg ；复方苍术油2组予47.6%复方苍术油，相当于生药量638.6 g/kg ；复方苍术油3组予33.3%复方苍术油，相当于生药量446.8 g/kg ；复方苍术油4组予23.8%复方苍术油，相当于生药量319.3 g/kg ；复方苍术油5组予16.9%复方苍术油，相当于生药量226.7 g/kg；溶剂对照组灌服调和油。给药后观察小鼠体重变化、饮食、外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况及中毒反应（中毒反应的症状、严重程度、起始时间、持续时间、是否可逆）等，观察14 d。对濒死及死亡动物及时进行尸检，其它动物在观察期结束之后进行尸检，观察内脏器官体积、颜色及质地有无改变，若有肉眼可见病变进行病理组织学检查。结果表明采用新药统计软件（NDST，5.1 版本）外理，用Bliss法计算LD50及95%的可信限。
       3  结果
       3.1  吸入急性毒性实验吸入染毒实验（2 h)过程中，各组小鼠均出现自发活动减少、静卧、嗜睡症状，给药组均有小鼠死亡。小鼠死亡一般发生在染毒过程中或染毒后 24 h内。小鼠死亡时的症状一般是：角弓反张、前后肢强直收缩、竖尾、蹬腿、死亡。未死亡小鼠恢复期内无异常表现。死亡动物及观察期结束处死动物经尸检，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑等器官，未见明显病理改变。结果见表1。
       表1  复方苍术油小鼠急性吸入毒性实验结果（略）
       LC50  为24 863.99 g/m3，95%的可信限是16 837.34～33 387.46 g/m3；n=10
       3.2  口服给药急性毒性实验口服急性毒性的实验小鼠灌胃给药后，主要毒性症状为：行动迟缓、静卧、昏睡、呼吸减弱、心跳减慢，直至死亡。毒性症状的轻重与剂量成正相关。小鼠死亡开始于给药后3.5 h，大多发生于给药后24 h以内。恢复期限小鼠无异常表现。死亡动物及观察期结束处死动物经尸检，肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、脑等器官，未见明显病理改变。结果见表2。      
       表2  复方苍术油小鼠口服给药急性毒性实验结果（略）
       LD50  为383.55 g/kg，95%的可信限是294.68～499.31 g/kg；n=10      
       4  讨论
          
       近年来，对中药复方的安全性研究日趋重视，临床前的药效毒理学研究工作已作为是否有进一步开发意义的依据。本研究发现：①小鼠口服复方苍术油的LD50为383.55 g/kg，95%的可信限是294.68～499.31 g/kg。按空气清新剂毒性定标准，小鼠口服急毒LD50≥  5 g/kg，判定为无毒。本受试物的LD50高于无毒标准的76倍，因此判定为无毒。②小鼠急性吸入复方苍术油的LC50为24 863.99g/m3，95%的可信限是16 837.34～33 387.46 g/m3。按空气清新剂毒性判定标准，小鼠急性吸入（2 h)LC50＞10 000 mg/m3，属实际无毒级。本受试物的LC50高于无毒标准的2 486倍，因此判定为无毒。所以，根据本实验结果可认为小鼠口服液和吸入复方苍术油后，其急性毒性较低。
       【参考文献】
         　　［1］ 高 英，李卫民，倪 晨，等.分子蒸馏技术在分离苍术油有效部位中的应用［J］.广州中医药大学学报，2004，21（6）：476.
       
       ［2］ 徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学，第2版［M］.北京：人民卫生出版社，1994：440.
       
       ［3］ 中国医学科学院药物研究工作所.中草药有效成分的研究［M］.北京：人民卫生出版社，1972：48.