文章标题 全文   多个检索词，请用空格间隔。

       【摘要】 
       目的研究不同剂量的野生制何首乌对大鼠的肝损伤。方法本实验给药组每天按不同剂量(分别相当于成人每日12 g临床用量的20，50，100，200 倍)灌胃大鼠一次,前3 个月为给药期, 第4个月为停药恢复期, 分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛(MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽-S转移酶(GSH - ST)检测及进行大鼠肝脏组织病理学检测。结果与对照组相比, 大剂量和较大剂量给药组对大鼠肝脏转氨酶AST在3个月时有一定的影响(P<0.05),MDA有显著性升高(P<0.05)。肝脏组织病理切片显示光镜下大剂量给药组可见散在炎细胞浸润, 肝血窦充血, 枯否氏细胞增生活跃并可见吞噬色素颗粒。结论制何首乌大剂量长期灌胃对大鼠肝脏有轻度的肝损害,常用剂量各阶段应用则未见毒副作用。停药后可恢复正常。
       【关键词】  制何首乌; 毒性实验
       中药何首乌别名首乌、赤首乌。为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根[1]。是一味较常用的中药,临床多以制首乌入药，制首乌味甘、涩、微温,具有补益精血、固肾乌须之功效。何首乌自古以来即为常用补药，今人又用于治疗动脉硬化症、高脂血症[2]等疾病。与此同时临床出现的不良反应也逐渐被人们重视起来。本试验旨在探求制何首乌不同剂量长期服用对大鼠肝脏损伤的程度,为临床更好的应用此药提供参考依据。现将对野生何首乌制品所进行长期毒性[3]动物实验研究的结果报告如下。
       1 材料
       1.1 动物健康SD大鼠100只,雌雄各半,体质量(100±10)g，由西安交通大学医学院动物实验中心提供,动物合格证号:医动字第08-004号。
       1.2 药材选用陕西野生何首乌，按照《中国药典》2005版Ⅰ部制何首乌标准进行炮制。然后将制何首乌水煎液浓缩至含生药4 g/ml，定容，密封后放于4℃冰箱储存备用。MDA，MAO，GSH - ST试剂盒购自南京市建成生物工程研究所。
       2 方法
       2.1 长期毒性实验健康SD大鼠100只，按性别体质量随机分成5组，即小剂量组、中剂量组、较大剂量组、大剂量组及对照组。每组20只，雌雄分笼饲养。给药组剂量依次为4，6，22，40g/kg(分别相当于成人每日临床用量的20，50，100，200倍)，对照组给予等体积蒸馏水。灌胃给药1次/d。每周称体质量1次，根据体质量调整给药容积[4] 。前3个月给药，第4个月停药恢复。分别于给药后的2个月、3个月及4个月末采取血液进行生化检测,同时在3个月末摘取大鼠肝脏匀浆进行丙二醛( MDA)、单胺氧化酶(MAO)、谷胱甘肽- S转移酶(GSH -ST)检测，并进行大鼠肝脏组织病理学检测。
       2.2 统计方法统计方法计量资料以均±s表示，用t检验进行组间比较，以P<0.05为差异显著。
       3 结果
       3.1 大鼠2个月血液生化学检测指标 结果显示大剂量组、较大剂量组AST、ALT无显著性变化。见表1。表1 给药2个月大鼠血液ALT，AST指标各给药组与对照组比较，P>0.05;n=10
       3. 2 大鼠3个月血液生化学检测指标　结果显示大剂量组、较大剂量组ALT无显著性变化,大剂量组AST显著升高(P<0.05) 。同时肝组织匀浆检测与对照组比, 大剂量组MDA有显著升高(P <0.05)。见表2。
       3. 3 大鼠4个月血液生化学检测指标　结果显示大剂量组AST，ALT无显著性变化。见表3。表2 给药3个月大鼠血液ALT，AST及组织中MDA，MAO，GSH-ST指标各给药组与对照组比较，*P<0.05;n=10表3 给药4个月大鼠血液ALT，AST指标各给药组与对照组比较，P>0.05;n=10
       3. 4 肝脏组织病理学检测肉眼观察各给药组大鼠肝脏, 其形态正常, 质地柔软, 多呈红褐色, 未见结节、包块、囊肿等; 3 个月末大剂量给药组可见个别大鼠肝脏略微发黄, 其它给药组肝脏无肉眼可见的病理性改变。
       肝脏病理切片光镜下, 对照组肝细胞轮廓清晰, 呈多边形, 细胞分界清晰, 核圆, 位于细胞中央, 胞浆丰富(见图1)。大剂量组血窦充血及炎细胞浸润较明显, 枯否氏细胞增生并可见吞噬色素颗粒(见图2)。其它给药组以及恢复期大鼠肝脏组织病理性变化不明显。
       图1 对照组肝脏组 图2 大剂量组肝脏组
       织病理学观察 织病理学观察
       4 讨论
       何首乌为临床常用中药,以往多认为无毒副作用,被广泛用于临床多种慢性病证;有人亦将何首乌当作延年益寿之补品,长期应用。但近年,临床发现某些患者服用何首乌后引起肝损害,导致肝功能异常,出现黄疸、过敏反应等。因此进一步评价何首乌的药理作用,尤其是对肝脏的作用具有重要意义。
       近年来的研究结果表明,肝损伤的病理生理过程是多因素参与的复杂过程。其中ALT和AST能敏感地反映肝细胞损伤与否及损伤程度,这是因为肝脏中ALT，AST浓度比血中高许多倍。在肝细胞坏死、细胞膜损伤时,转氨酶从高梯度的肝脏向血中释放,使血清中ALT，AST增加。同时自由基和脂质过氧化在肝损伤中起着十分重要的作用。机体通过酶系统和非酶系统产生的氧自由基,攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸引发脂质过氧化反应,并由此形成脂质过氧化物, 使组织细胞受损伤。丙二醛(MDA)是脂质过氧化物的分解产物,其含量的变化可反映组织细胞的损伤程度。GSH-ST存在机体各种组织中,以肝脏为最多,其具有消除体内自由基和解毒双重功能,此酶活力的大小,可反映机体氧化能力的高低,并对肝脏的早期损伤及肝癌的早期诊断具有一定价值。MAO是诊断肝硬化的一项重要指标,肝硬化时MAO活性常明显增高。本实验结果得出在给药2个月、4个月后各个剂量组与对照组比较其生化检测无显著性变化;大剂量组与对照组比较在给药3个月时AST有一定的影响(P<0.05);同时在给药90 d时显示大剂量组MDA有显著性增高(P<0.05),而GSH -ST、MAO无显著性变化,其他剂量组无明显的变化。病理学检测大剂量组血窦充血及炎细胞浸润较明显, 枯否氏细胞增生并可见吞噬色素颗粒。其它给药组以及恢复期大鼠肝脏组织病理性变化不明显。因此可得知,使用大剂量的制何首乌长期灌胃,对大鼠肝脏仅有轻度的损害。提示我们在服用何首乌时, 剂量与服药时间的选择是很重要的, 野生制何首乌在临床用用量范围(6～12g) 可以放心使用。 长期服用基本无毒副作用, 临床使用比较安全。但应尽量避免长期大剂量服用何首乌, 若病情需要长期大剂量服用时, 应密切关注病人ALT，AST指标的变化。
       【参考文献】
         　[1] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005：122.
       
       [2] 国家中医药管理局.中华本草，第2册[M].上海:上海科技出版社，1999：671.
       
       [3] 徐叔云,卞如濂,陈 修.药理实验方法学，第3版[M].北京：人民卫生出版社，2002：231.
       
       [4] 陈 奇.中药药理研究方法学[M].北京：人民卫生出版社,2000：288.