灵芝孢子多糖增强免疫力的研究(Ⅰ)
作者:冯鹏, 沈建, 刘诚, 吴东, 孙予罕
作者单位:中国科学院南京中科集团股份有限公司,江苏 南京 210008
《时珍国医国药》 2007年 第4期
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【摘要】
目的观察中科特泰胶囊对小鼠免疫力的影响。方法将120只健康雌性小鼠分为3个实验组,每组分高、中、低和对照4个剂量组,连续灌胃给药30 d后,分别进行小鼠炭粒廓清实验、DNFB诱导小鼠DTH实验、血清溶血素测定实验,测定相关的免疫学指标。结果各剂量组对DNFB诱导小鼠DTH均无明显影响(P>0.05);高、中剂量组能增加小鼠炭粒廓清的吞噬指数和HC50,与对照组比较差异性显著(P<0.05)。低剂量对各项指标均无明显影响。结论 中科特泰胶囊对小鼠的免疫力具有一定的增强作用。
【关键词】 特泰胶囊; 炭粒廓清
Study of Immunemodulation of Ganoderma Ganoderma Spora Polysaccharide(Ⅰ)
FENG Peng,SHEN Jian ,LIU Cheng, WU Dong,SUN Yuhan
1.Institute of Coal Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Taiyuan 030001,China;
2.Graduate School of the Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039,China;
3.Nanjing Zhongke Group Corp. Ltd., Nanjing 210008,China
Abstract:ObjectiveTo observe the immunemodulation effect of Zhongke Tetai capsule in mice.Methods120 mice were divided into 3 groups,each group had high,medium,low and control dose,after intrapastic injection 30 days,rats carbon clearance capacity test,DTH induced by DNFB test, and hemolysin test were carried to test relative immune indexes.ResultsEvery group had no significant effect on mouse DHT induced by DNFB;high,medium groups could enhance mouse clearance capacity index and HC50 which showed obvious difference from model group(P<0.05),low group had no obvious effect on each index. ConclusionZhongke Tetai capsule can enhance the immune function of mice.
Key words:Tetai capsule; Carbon clearance
自20世纪70年代日本学者率先报道了灵芝具有抗肿瘤作用后,国内学者在研究灵芝“扶正固本”的中医药理过程中,发现灵芝多糖具有多种免疫增强作用,并提出灵芝多糖的抗肿瘤作用也是通过提高动物的免疫功能介导的。从目前公开发表的研究报告中可以看出灵芝多糖的免疫调节作用主要集中在以下几个方面:促进单核/巨噬细胞系统的吞噬功能、促进细胞免疫功能、调节体液免疫功能、抗过敏、抗辐射和抗免疫抑制等[1]。由灵芝孢子经水提、醇沉等中药现代化手段获得的孢子多糖制成的中科特泰胶囊富含灵芝多糖和多肽,前期实验表明其在抗肿瘤、改善心脑血管疾病方面都要一定效果。本实验拟考察特泰胶囊对免疫系统的影响。
1 材料和方法
1.1 样品中科牌特泰胶囊由南京中科药业有限公司提供,为瓶装胶囊,内容物为褐色粉末,人体推荐量为内容物每人净重800 mg/人/d。置于密闭、阴凉干燥处保存,供实验用。
1.2 试剂DNFB、SRBC、豚鼠血清、印度墨汁。
1.3 动物选用上海西普尔-必凯实验动物有限公司繁殖的18.0~20.9 g F1健康雌性小鼠120只,合格证号:SCXK(沪)2003-0002,随机分为3个实验组,分别进行炭粒廓清实验,DTH实验和血清溶血素测定实验。
1.4 剂量每个实验组分别分为67 mg/kg(低剂量组),133 mg/kg(中剂量组),400 mg/kg(高剂量组)和空白对照组。经口1次/d给于小鼠相应剂量的受试物,空白组给于等剂量的生理盐水。连续给药30 d后测量各项增强免疫力功能指标。
1.5 仪器T1000型电子动物称、722型分光光度计、打孔器。
1.6 方法
1.6.1 小鼠炭粒廓清实验
各剂量组连续灌胃30 d,每鼠尾静脉注入4倍稀释的印度墨汁(0.1 ml/10 g.bw),注入2 min及10 min分别从眼内眦静脉丛取血20 μl,并将其加到2 ml0.1%Na2CO3溶液中,用722型分光光度计在600 nm波长处测定光密度值。
1.6.2 DNFB诱导小鼠DTH试验(耳肿胀法)
各剂量组连续灌胃30 d。每鼠用剪刀将腹部毛剪去,范围约3 cm×3 cm,用1%DNFB溶液50 μl均匀涂抹致敏。5 d后用1%DNFB溶液10 μl均匀涂抹于小鼠右耳进行攻击,同时用不含DNFB的溶液10 μl均匀涂抹于小鼠左耳作对照。攻击后24 h颈椎脱臼处死小鼠,剪下左右耳壳,用打孔器取下直径8 mm耳片,称重。同时取下小鼠脾脏、胸腺并称重,计算脏器系数。
1.6.3 血清溶血素测定
实验各剂量组连续灌胃30 d。制备2%的绵羊红细胞(SRBC)悬液,每只鼠腹腔注射0.2 ml进行免疫,4d后摘除眼球取血于离心管中,放置1 h,200 r/min离心10 min,分离并收集血清。血清200倍稀释后,按检验方法测定样品管及SRBC半数溶血时的光密度值。溶血素的量以半数溶血值(HC50)表示。
1.7 数据统计方法
用SPSS10.0软件对原始数据进行方差齐性检验,满足“方差齐”要求的数据资料用单因素方差分析和多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计处理;对非正态分布或方差不齐的数据资料进行适当的变量转换,待满足“正态方差齐”要求后,用转换所得的数据进行统计处理。
2 结果
2.1 中科特泰胶囊对小鼠炭粒廓清作用的影响由表1的结果可见,高、中剂量组显著升高了小鼠的吞噬指数,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),表明其具有增加巨噬细胞吞噬能力的作用。表1 中科特泰胶囊对小鼠炭粒廓清作用的影响(略)
2.2 中科特泰胶囊对DNFB诱导小鼠DTH的影响由表2的结果可见,高、中、低剂量组对小鼠耳壳肿胀与对照组比较均没有明显差异(P>0.05)。表3的结果可见,高剂量组小鼠胸腺/体重比值明显高于对照组,且有显著性差异(P<0.05)。表2 中科特泰胶囊对DNFB诱导小鼠DTH的影响(略)
2.3 中科特泰胶囊对小鼠血清溶血素形成的影响由表4的结果可见,高、中剂量组小鼠HC50明显提高,与对照组相比较差异性显著(P<0.05)。表3 中科特泰对淋巴器官的影响(略)表4 中科特泰胶囊对小鼠血清溶血素形成的影响(略)
3 讨论
《神农本草经》[2]记载灵芝,苦平,无毒,益心气,解胸中结,增智慧,不忘延年。灵芝除含有三萜类、多糖类、甾醇类、生物碱类、呋喃类和脂肪酸等化合物外,还含有氨基酸、维生素等。全世界灵芝种类很多,分布广泛。灵芝药理活性主要表现为抗肿瘤作用,免疫调节作用,抗氧化自由基作用,降血糖作用,降血压作用,调节血脂作用,抗过敏、平喘作用,保肝作用,抗缺氧作用,抗衰老作用和抗放射作用等。临床应用在治疗慢性气管炎、冠心病、肝炎、高血脂症、神经衰弱、白细胞减少症、肌营养不良、肌强直等,以及肿瘤的辅助治疗[3]。中科特泰胶囊主要成分为灵芝多糖以及多肽。由实验结果可看出,连续给药30 d后,高、中剂量组对小鼠的巨噬细胞吞噬能力/血清溶血素形成能力以及小鼠胸腺/体重比值均有明显提高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),说明中科特泰胶囊对小鼠的免疫能力具有一定的改善与提高。其具体机制还在进一步的研究中。(未完待续)
【参考文献】
[1]张卫民,孙晓明,吴素玲,等.灵芝孢子免疫调节作用研究[J].中国野生植物资源,2001,20(1):19.
[2]魏·吴 普,清·孙星衍.神农本草经[M].沈阳:辽宁科学技术出版社,1997:9.
[3]冯 敏,沈 建.东方神奇仙草—现代科学论灵芝[M].北京:科学出版社,2005:8.