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       【摘要】 
       目的同时测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量。方法采用高效液相色谱［RP-HPLC（DAD）］法，梯度洗脱，测定头花蓼中没食子酸与槲皮苷的含量。结果平均回收率分别为98.92%，97.16%（n=5），RSD分别为2.85%，1.07%（n=5）。结论该方法准确、简捷，可为评价头花蓼质量提供参考。
       【关键词】  头花蓼； 没食子酸； 槲皮苷； 高效液相色谱
       Determination of Gallic Acid and Quercitrin in  Polygonum  capitatum by HPLC
       WU Hongmei，HE Zhuying，WANG Xiangsen，HE Shunzhi
       (Guiyang College of TCM,Guiyang 550002，China; The First Affiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550001，China；Tibetan Motuo County Motuo Town Government,Motuo,Tibet 860016,China)
       Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method for determination of gallic acid and quercitrin in Polygonum  capitatum.MethodsThe gallic acid and quercitrin in Polygonum  capitatum were determined by RP-HPLC(DAD) and the gradient elution mode was applied in chromatographic separation.Results The average recoveries were respectively 98.92% and 97.16%（n=5），RSD 2.85% and RSD1.07%（n=5）for gallic acid and quercitrin .ConclusionThe method is simple,accurate and can be used for the quality study of Polygonum  capitatum.
       Key words：Polygonum  capitatum；  Gallic acid；  Quercitrin；  HPLC
       
       头花蓼为蓼科植物头花蓼Polygonum  capitatum Buch.-Han.ex D.Don的干燥全草或地上部分,主产于贵州、云南、四川、西藏、广西等省区，为苗族用药，临床用于治疗泌尿系统感染、血尿、湿疹、肾盂肾炎、膀胱炎、尿路结石、风湿痛、跌打损伤、痄腮、疮疡、腹泻和痢疾等［1］。文献报道［2，3］了紫外分光光度法测定不同产地头花蓼中总黄酮及采用高效液相色谱法测定头花蓼中没食子酸的含量，但同时测定头花蓼药材中槲皮苷和没食子酸含量的方法尚未见报道。本实验采用高效液相色谱法同时测定头花蓼药材中槲皮苷和没食子酸的含量，以期为头花蓼药材及其制剂的质量控制提供参考。
       1  仪器与材料
       
       Agilent1100型高效液相色谱仪(自动进样品)，二极管阵列检测器(DAD)，TCX-250W超声波提取器，AB104-N电子天平。
       
       槲皮苷对照品（批号111538-200301）、没食子酸（批号0638-9501）对照品均为中国药品生物制品检定所提供。乙腈为色谱纯，其它试剂均为分析纯，水为重蒸镏水。头花蓼药材：分别产自贵州、云南、西藏等地，均由贵阳中医学院王祥培副教授鉴定。
       2  方法与结果
       2.1  色谱条件采用依利特Hypersil ODS色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），乙腈-0.2%磷酸二元梯度洗脱，体积流量：0.8 ml/min，检测波长310 nm，柱温25℃。
       2.2  流动相条件0～5 min：乙腈 0%～5%、0.2%磷酸 100%～95%；5～55 min：乙腈 5%～25%、0.2%磷酸 95%～75%。在上述色谱条件下，对照品和样品的色谱见图1。
       2.3  线性关系的考察   精密称取槲皮苷对照品12.36 mg，没食子酸对照品7.456 mg，各加甲醇溶解定容至100 ml，作为贮存溶液。精密吸取上述对照品溶液1，2，4，6，8，10 μl，分别依次进样，以进样量（μg）为横坐标，色谱峰面积为纵坐标进行回归分析，得回归方程为槲皮苷：Y=2 895.3X-20.58,r=0.999 7,线性范围0.123 6～1.236 μg；没食子酸：Y=683.04X+0.691 8,r=0.999 5, 线性范围0.074 56～0.745 6 μg。
       2.4  供试品溶液制备  取头花蓼细粉（3号筛）1 g，精密称定，置圆底烧瓶中，分别加50 ml80%甲醇，置水浴中加热回流1 h，滤过，残渣加50 ml80%甲醇回流提取1 h，滤过，合并滤液。滤液置蒸发皿中挥干，残渣加80%甲醇定容置10 ml容量瓶中。用微孔滤膜(0.45 μm) 滤过，取续滤液，即得。
       2.5   精密度实验  吸取对照品溶液10 μl，连续进样5次,记录色谱图,结果槲皮苷、没食子酸峰面积的RSD分别为0.96%，1.27%。
       2.6  稳定性实验  取同一供试品溶液，分别在0，2，6，10，14，18 h进样，记录色谱图，结果槲皮苷、没食子酸峰面积的RSD分别为1.45%，1.26%。表明供试品溶液在0～18 h内稳定性良好。
       2.7  重复性实验  取同批药材5份，精密称定，按“2.4”项下供试品溶液制备方法制备并测定，槲皮苷平均含量为0.26%，RSD为1.12%；没食子酸平均含量为0.084%，RSD为1.95%。
       2.8  回收率实验  取已知含量头花蓼粉末5份，每份约0.5 g，精密称定，分别精密加入一定量的没食子酸、槲皮苷对照品溶液，按“2.4”项下供试品溶液制备方法制备并测定，计算，没食子酸、槲皮苷的平均回收率分别为98.92%，97.16%，其RSD分别为2.85%，1.07%，表明该方法回收率较好。结果见表1～2。
       2.9  样品含量测定  精密吸取对照品溶液与头花蓼药材供试品溶液各10 μl，按上述色谱条件测定，并计算槲皮苷、没食子酸的含量。结果见表3。
       表1  没食子酸回收率实验结果（略）
       表2  槲皮苷回收率实验结果（略）
       表3  头花蓼中槲皮苷与没食子酸的含量（略）
       图1  头花蓼的HPLC色谱图（略）
       3  讨论
       
       根据实验的数据结果可知，本实验测得的没食子酸含量均低于文献报道［3］的含量，可能是头花蓼药材中没食子酸多与鞣质结合的形式存在。
       
       2003年版《贵州省中药材·民族药材质量标准》只规定了头花蓼药材中槲皮素含量，本研究同时进行了槲皮苷与没食子酸的含量测定，在上述色谱条件下，待测成分与相邻峰达到基线分离，且回收率高，重复性好，为更好地控制头花蓼药材及其制剂的内在质量提供了参考。
       【参考文献】
         　　［1］ 全国中草药汇编编写组. 全国中草药汇编（下册）［M］.北京：人民出版社，1978：282.
       
       ［2］ 王祥培，万德光，王祥森，等.不同产地野生与栽培头花蓼中总黄酮的含量分析［J］.时珍国医国药, 2006,17（9）：889.
       
       ［3］ 王祥培，万德光，王 强，等. HPLC测定不同产地的头花蓼中没食子酸的含量［J］.华西药学杂志，2007，22（2）：204.