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       【摘要】 
       目的对长白楤木根、茎、叶中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于360 nm波长处测定。结果总黄酮在4.08～32.64 μg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为：A=0.018 3C+0.012 7,R2=0.999 2；平均加样回收率为100.63％ (RSD=1.93％)。结论该方法简便、准确，可用于长白楤木的质量控制。
       【关键词】  长白楤木； 紫外分光光度法； 总黄酮
       Determination of the Total Flavonoids in Roots ,Stalks and Leaves of Aralia continentalis Kitagwa by Spectrophotometry
       NING Deli，RUAN Hongsheng，HAN Chengwei，HUANG Jinren，YIN Kuide*
       （Life Science and Technology College, HLJ August First Land Reclamation University ,  Daqing, Heilongjiang,163319,China；HLJ Forest Vice-special Product Research Institute, Mudanjiang,Heilongjiang 157011,China）
       Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of the total flavonoids in roots, stalks and leaves of Aralia continentalis Kitagwa.MethodsThe total flavonoids in roots, stalks and leaves of Aralia continentalis Kitagwa  were determined by spectrophotometric method at 360 nm wavelength．ResultsSample size showed a good linear relationship at the range of 4.08～32.64 μg/ml，and the curve was A=0.018 3C+0.012 7, R2=0.999 2．The average recovery was 96.2％ and RSD was 1.42％ (n=6)．ConclusionThis method is easy and accurate，and can be used for quality control of Aralia continentalis Kitagwa．
       Key words：Aralia continentalis Kitagwa；   Spectrophotometric method；   Total flavonoids
       
       长白楤木Aralia continentalis Kitagawa属于五加科楤木属，多年生宿根草本植物，又称草本刺老芽、东北土当归，分布于我国吉林、辽宁、河北、河南、四川和西藏等省区，朝鲜、前苏联也有分布［1］。长白楤木是一种食药兼用的经济植物、营养丰富的名贵珍稀山野菜。具有祛风燥湿、解热镇痛、疏风活血、利尿解毒等功效［2］，主治风湿性腰腿痛、腰肌劳损等病证［3］。近年来，有研究机构从该植物中分离出6种具有药用价值的黄酮类化合物。由于长白楤木药食兼用，而且具有很高的经济价值，对其进行深入研究非常重要。我们采用紫外-可见分光光度法对长白楤木中所含总黄酮的含量进行了测定，为其质量控制及进一步的开发利用提供依据。
       1  器材与试剂
       1.1  样品长白楤木取自于黑龙江省牡丹江林副特产研究所和大庆百合环艺中心。
       1.2  试剂芦丁对照品购自南京青泽医药科技有限公司；无水三氯化铝、95%乙醇等均为分析纯。
       1.3  仪器AL204型电子分析天平（梅特勒-托利多）；TU-1800紫外分光光度仪（北京普析通用仪器有限责任公司）；RE-52A型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。
       2  方法与结果
       2.1  样品溶液的制备将采摘回来的长白楤木进行根、茎、叶分离，105℃杀青1 h，然后在85℃烘干24 h，再进行粗粉碎，放于干燥器中备用。称取经处理过的样品适量，加入10倍量的80%乙醇，加热回流提取3次，1.5 h/次。合并提取液，过滤，滤液减压回收并浓缩至3 ml/g药材左右，浓缩液加2倍量水稀释，静置24 h。抽滤除去不溶性物质，滤液再次浓缩后加水至一定体积，即得长白楤木样品溶液［4］。
       2.2  对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10.2 mg，置于50 ml容量瓶中，加入95%乙醇定容至刻度，超声溶解5 min，配成0.204 mg/ml标准品溶液，冷藏保存备用。
       2.3  测定波长选择稀释到一定浓度的对照品和样品溶液分别加10%AlCl3溶液1 ml，以95%乙醇定容，摇匀，显色30 min。在200～600 nm波长范围内紫外扫描。发现360 nm处出现最大吸收波长，实验中选择测定波长为360 nm。
       2.4  线性关系考察精密吸取芦丁标准品溶液0，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4 ml于25 ml容量瓶中，分别加入10%AlCl3溶液1 ml，95%乙醇定溶至刻度，摇匀。显色30 min后于紫外分光光度计下测定吸收值，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果以吸光度A对浓度C作最小二乘法回归，标准曲线方程为：A=0.018 3C+0.012 7，R2=0.999 2，线性范围为4.08～32.64 μg/ml。
       2.5  稳定性实验取2 ml样品液于25 ml容量瓶中加10%AlCl3溶液1 ml，用95%乙醇定容至刻度，于室温条件下每隔10 min测定1次吸光值，结果发现供试品溶液放置30 min后显色完全，且在1 h内稳定，RSD=2.13%。
       2.6  精密度实验配制一定浓度样品溶液测定吸光度，连续测定5次其RSD=1.25%，说明仪器精密度良好。
       2.7  加样回收率实验分别精密量取已知总黄酮含量的提取溶液5份，分别加入一定量的芦丁标准品，按上述操作方法进行，用紫外法测得吸光度，得出总黄酮含量，根据回收率公式计算出加样回收率。结果见表1。结果表明，本方法具有良好的加样回收率。
       表1  加样回收率实验（略）
       2.8  样品溶液中总黄酮的含量测定按“2.2”项方法分别制备1年生、2年生、3年生、5年生根茎叶样品溶液分别取适量样品溶液于25 ml 容量瓶中加入10%AlCl3溶液1 ml，以95%乙醇定容摇匀，室温显色30min，在紫外分光光度计下测定吸光值，根据标准曲线方程计算结果见表2。
       表2  长白楤木总黄酮含量测定结果（略）
       表2可知随着生长时间的增加，长白楤木中总黄酮含量有所增加。其中根、茎中总黄酮含量以3年生最多，生长时间不同有所波动，叶中总黄酮含量随生长时间增长而增加，平均含量中3年生的长白楤木总黄酮含量最多。因此，长白楤木根、茎、叶最佳采收时间应为其生长3年和5年时。
       3  结论
       
       关于长白楤木成分分析的研究目前仅有关于多糖的有关报道，而关于其黄酮的含量测定一直未见报道。本文所采用的方法测定结果表明的叶中总黄酮含量最多，为开发利用黄酮类药物和保健品植物资源提供理论依据。本实验采用紫外-分光光度法测定长白楤木中总黄酮的含量，精密度、稳定性、重复性良好，加样回收率合格，为长白楤木中总黄酮的含量测定提供了一种简便可行的方法，为长白楤木的质量控制提供了评价手段。
       【参考文献】
         　　［1］ 何 景,曾沧江.中国植物志，第54卷［M］.北京:科学出版社，1978:1270.
       
       ［2］ 刘兴权.长白楤木的利用价值及栽培技术［J］.特种经济动植物，2001,4(4):26.
       
       ［3］ 栾舒雅,李 峰,张沙艳,等.长白楤木多糖理化性质研究［J］.安徽农业科学,2007,35(11):3214.
       
       ［4］ 游本刚,唐丽华,刘 扬.紫外分光光度法测定珍珠菜中总黄酮的含量［J］.中国野生植物资源,2007,26（1）:43.