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       【摘要】 
       目的建立酸浆不同药用部位中总黄酮的含量测定方法。方法以芦丁为对照品，采用分光光度法测定酸浆不同药用部位中总黄酮的含量。结果芦丁在5.25～52.5 μg/ml范围内呈良好的线性关系;酸浆萼、酸浆果实、酸浆地上部分的平均回收率(n=6)分别为100.3%，99.2%，100.0%，RSD分别为1.80%，1.75%，1.70%。结论该方法简单，数据可信，为科学使用酸浆不同药用部位提供了可靠依据。
       【关键词】  酸浆; 总黄酮; 芦丁
       Abstract：ObjectiveTo establish the determination methods of total flavonoid from different medicinal parts in Physalis alkekengi L.var.franchetii (Mast.)Makino.MethodsThe content of total flavonoid in Physalis alkekengi L.var. franchetii (Mast.)Makino was determined using colorimetric with rutin as a standard product. ResultsThe linear range of rutin was 5.25～52.5μg/ml.The average recoveries (fruit calyx,fruit,herba of Physalis Alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino ,n=6) were 100.3%, 99.2%,100.0%，with RSD of 1.80%,1.75%,1.70%.ConclusionThe method is simple ,the data are reliable.It can provide a reliable basis for scientific use in different medicinal parts of Physalis.
       Key words：Physalis alkekengi L.var.franchetii(Mast.)Makino; Total flavonoid; Rutin
       酸浆Physalis alkekengi L.var.franchetii (Mast.)Makino别名红姑娘、灯笼草、锦灯笼、洛神珠、挂金灯，为茄科酸浆属多年生宿根草本, 其宿萼、鲜萼、全草、果实均可入药， 其性味甘、 酸、 寒，有清凉、消肿、利尿、止咳、 化痰之功效，是常用的清热解毒药[1]。初步研究发现，酸浆果实和宿萼中富含黄酮类物质，而黄酮类化合物具有显著的抗氧化功能，且为一种有效的自由基清除剂，具有抗肿瘤、抗糖尿病、抗菌及抗病毒等功效。关于酸浆的营养和活性成分分析已有了一定的研究[2～4], 但有关酸浆不同药用部位中总黄酮提取及含量测定在国内尚未见报道。本实验以芦丁为对照品，采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法测定了酸浆不同药用部位中总黄酮含量，建立了稳定可靠且重现性好的测定方法，为科学使用酸浆不同药用部位提供了可靠依据。
       1 仪器与试药
       722型紫外分光光度计(上海第三分析仪器厂);KQ-3200型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);AUW120D电子分析天平(日本岛津)。芦丁对照品购自中国药品生物制品检定所，系含量测定用。酸浆药材(鲜萼、宿萼、果实、地上部分)产地及来源见表4;所用试剂均为分析纯。
       2 方法与结果
       2.1 溶液的制备
       2.1.1 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品6.56 mg，置25 ml容量瓶中，加70%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
       2.1.2 供试品溶液的制备分别取酸浆萼粗粉约0.5 g,酸浆地上部分粗粉约0.5 g，酸浆果实(剪碎)约2 g，精密称定，置锥形瓶中，加40 ml 70%甲醇溶液超声处理30 min(功率120 W，频率40 kHz)，滤过，滤液蒸干，残渣用70%乙醇溶液适量使溶解并定量转移至10 ml容量瓶中，加70%乙醇溶液至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
       2.2 标准曲线的绘制精密量取“2.1.1”项下对照品溶液0.5，1，2，3，4，5 ml分别置25 ml量瓶中，各加水至6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml，混匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加入氢氧化钠试液10 ml，再加水至刻度，摇匀，放置15 min。以相应试剂为空白，于510 nm波长处测定吸光度。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为Y=0.016 8 X+0.003 1，r=0.999 9，结果表明芦丁在5.25～52.5 μg/ml范围内呈良好的线性关系。
       2.3 稳定性实验分别取酸浆宿萼、酸浆地上部分、酸浆果实供试品溶液各2 ml，按“2.2”项下方法操作，对同一显色后的供试液每隔一段时间测定一次吸收度，结果吸光度在1.5 h内无明显差异，RSD分别为1.46%(n=6)、1.30%(n=6)、1.30%(n=6),表明显色后的供试液在1.5 h内稳定性良好。
       2.4 精密度实验分别精密吸取同一供试液(酸浆宿萼、酸浆地上部分、酸浆果实，按“2.1.2”项下方法制备) 2 ml 6份于25 ml量瓶中，按“2.2”项下方法自“各加水至6 ml……”起操作，测定吸光度，结果平均含量分别为0.85%，0.60%，0.12%，RSD值分别为1.21%，1.25%，1.39%(n=6)，证明该方法精密度良好。
       2.5 重复性实验分别称取酸浆宿萼粉末、酸浆地上部分粉末、酸浆果实(剪碎)各6份，精密称定，按“2.7”项下方法操作，测定吸光度，测得3种不同药用部位中总黄酮含量分别为0.86%，0.60%，0.12%，RSD值分别为1.71%，1.94%，1.78%(n=6),说明本方法重复性良好。
       2.6 回收率实验 在已知含量的3种部位药材粉末中,加入一定量的芦丁对照品，按供试品溶液制备方法制备，显色，测定吸光度，计算回收率。结果见表1～3。表1 酸浆宿萼总黄酮回收率测定结果由表1～3结果可知，各部位的平均回收率分别为100.3%，100.0%，99.2%，且RSD值均小于2%，故认为用上述方法测定酸浆总部位中总黄酮含量完全可行。
       2.7 样品含量测定分别精密称取酸浆宿萼、酸浆鲜萼、酸浆果实(冷冻)、酸浆果实(常温)、酸浆地上部分5种药材，按照“2.1.2”项下样品溶液制备方法操作，制得样品溶液，按“2.2”项下方法显色，测定吸光度,计算总黄酮含量。结果见表4。　　表2 酸浆地上部分总黄酮回收率测定结果表3 酸浆果实(鲜果)总黄酮回收率测定结果表4 酸浆不同药用部位中总黄酮含量测定结果
       3 讨论
       黄酮含量测定多采用亚硝酸钠-硝酸铝法显色，通过紫外-可见分光光度计测定其含量，本实验也采用该方法测定酸浆不同药用部位中总黄酮的含量，结果表明该方法简便、快速、准确，可用于酸浆药材质量的检测手段之一。
       由表4结果可知，酸浆各部分中的总黄酮含量分别为鲜萼>宿萼>地上部分>冷冻果实>常温果实。由于各部分的药用价值不同，例如酸浆地上部分能清热解毒、利尿,可治热咳、咽痛、黄疸、水肿;宿存花萼或带有成熟果实的宿存花萼能清热解毒、利咽化痰等，所以测定酸浆不同用药部位总黄酮的含量，对于合理科学地利用酸浆各部位药材，具有重要的指导作用。
       【参考文献】
         　[1] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005:250.
       
       [2] 赵 倩, 董艳丽, 曲戈霞, 等.酸浆宿萼挥发性成分的研究[J].中药研究与信息, 2005, 7 ( 4) : 10.
       
       [3] Lin Y S , Chiang H C.Immunonodulatory activity of various fractions derived from physalia angulataL. extract[J].Am. J . Chin. Med,1992, 20(324) :233.
       
       [4] 刘俊花, 张宝善, 葛 玉.新型水果酸浆的研究开发现状[J].食品研究与开发, 2005, 26 ( 3) : 31.