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       【摘要】 
       目的改进栀子药材中栀子苷的含量测定方法。方法比较了《中国药典》2005版栀子药材中栀子苷的含量测定方法和改进方法，用HPLC法测定栀子苷含量，流动相为乙腈-水(15∶85)，检测波长为238 nm。供试品用60%乙醇作为提取溶剂，超声处理，制得供试品溶液。结果改进方法所测定栀子中栀子苷含量高于药典法。栀子苷在0.075～0.60 μg/ml范围内线性关系良好，r=0.999 2，平均加样回收率为100.45%，RSD=1.69%。结论该法灵敏、准确、重现性好，可用于栀子药材的质量控制，为改进栀子的含量测定方法提供依据。
       【关键词】  栀子; 栀子苷; 含量测定; 高效液相色谱
       Abstract：ObjectiveTo improve the method for determination of geniposide in Fructus Gardeniae.MethodsThe improved method of assay method of geniposide in Fructus Gardeniae was compared with the pharmacopoeia method. The content of geniposide was determined by HPLC at 238 nm detection wavelength with acetonitrile- water(15：85)as mobile phase. The sample was treated with 60% ethanol as solvent extraction， ultrasonic extraction， and the obtained sample solution was used for determination. ResultsThe improved method for determination of geniposide was superior to the pharmacopoeia method. Geniposide in the range of 0.075 ～ 0.60μg/ml was linear， r=0.999 2， average recovery was 100.45%， RSD=1.69%. ConclusionThis method is sensitive， accurate， reproducible， and can be used for the quality control of Fructus Gardeniae andsupplies reference evidence for the assay of Fructus Gardeniae.
       Key words：Fructus Gardeniae; Geniposide; Assay; HPLC
       栀子始载于《神农本草经》，为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实，具有泻火除烦，清热利尿，凉血解毒之功效，用于热病心烦，黄疸尿赤，血淋涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛[1]。栀子的化学成分主要包括环烯醚萜苷类、，有机酸类、绿原酸、藏红花素、挥发油等。《中国药典》2005年版Ⅰ部[1]对栀子药材中栀子苷的含量进行了测定并规定了限度。在文献报道中，也多参照药典的方法来测定栀子苷含量[2，3]。
       本文采用改进方法对栀子苷含量进行了测定，结果显示改进方法所测定栀子中栀子苷含量高于药典法，可用于栀子药材的质量控制，为进一步完善《中国药典》的含量测定方法提供参考。
       1 仪器与试药
       1.1 仪器高效液相色谱仪(日本岛津);UV-1700型紫外分光光度计(日本岛津);StartoriousBP211D电子天平(德国);色谱柱：Phenomenex luna C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);SZ-93型自动双重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)。
       1.2 试药栀子苷对照品购于中国药品生物制品检定所，批号：110749-200613，供含量测定用;栀子药材购于四川成都荷花池中药材市场(大丰)，经鉴定为中国药典2005年版Ⅰ部收载的栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。试剂：甲醇、乙腈为HPLC级分析纯;水为重蒸馏水。
       2 方法与结果
       2.1 色谱条件色谱柱：Phenomenex luna C18(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：乙腈-水(15∶85);流速：1 ml/min;柱温：25℃;检测波长：238 nm;理论塔板数按栀子苷峰计算不低于3 000，栀子苷峰与相邻杂质峰的分离度符合要求。在上述色谱条件下，对照品溶液、供试品溶液和阴性样品的色谱图见图1。
       2.2 标准曲线的制备精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每毫升含300 μg的对照品溶液。取对照品溶液，于200～400 nm之间进行光谱扫描，得栀子苷最大吸收波长为238 nm。精密吸取不同量的栀子苷对照品溶液，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别制得7.5，15.0，30.0，45.0，60.0 μg/ml的对照品溶液。分别精密吸取10 μl对照品溶液，进样，测定峰面积。结果见表1。以峰面积积分值为纵坐标，栀子苷的含量 (μg)为横坐标进行线性回归，得回归方程为Y= 60 968 x +20 245，r=0.999 2。结果表明，在上述色谱条件下，栀子苷含量在0.075～0.60 μg范围内线性关系良好。a. 栀子苷对照品　　b. 供试品c. 阴性样品图1 HPLC图表1 线性关系考察数据表
       2.3 供试品溶液的制备分别精密称取栀子药材粉末(过4号筛)0.1g，置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇、70%，50%甲醇，70%，60%，50%乙醇等不同溶剂各50 ml，称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液5 ml，定容至10 ml，按“2.1”项下色谱条件测定栀子苷含量。结果见表2。表2 不同溶剂提取栀子苷测定结果
       2.4 精密度实验取对照品溶液，按上述色谱条件，分别重复进样5次，测定，结果见表3。表3 精密度实验数据表
       2.5 稳定性实验取供试品溶液，按上述色谱条件，分别在0，2，4，，8，24 h进样，测定，结果见表4。表4 稳定性实验数据表
       2.6 重现性实验取同一批栀子药材，用60%乙醇溶液为溶剂，分别制备5份供试品溶液，在上述色谱条件下测定。结果见表5。表5 重现性实验数据表
       2.7 加样回收率实验精密称取已知含量的栀子药材粉末0.05 g，共5份，分别精密加入一定量的对照品，再分别精密加入60%乙醇溶液50 ml。称定重量，超声处理30 min，放冷，再称定重量，用60%乙醇溶液补足减失重量，摇匀，过滤。取续滤液5 ml，置10 ml量瓶中，定容，摇匀，即得。在上述色谱条件下测定栀子苷的含量。结果见表6。表6 回收率实验结果
       2.8 样品测定取栀子药材粉末(过4号筛)约0.1 g，分别按照《中国药典》2005年版Ⅰ部方法和上述改进方法制备供试品溶液，进行测定。结果见表7。表7 不同方法提取栀子苷测定结果
       3 讨论
       文献报道[4]用50%甲醇提取效果优于中国药典的方法。本研究对供试品溶液的制备方法进行了考察，结果表明以60%乙醇溶液50 ml作为溶剂，超声处理30 min，提取效果优于中国药典方法和文献方法。此方法准确可靠，且减少了有害试剂的使用，可用于栀子药材的质量控制，为进一步完善其含量测定的方法提供参考。
       【参考文献】
         [1] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京：化学工业出版社，2005：173.
       
       [2] 刘 瑛，张 浩.栀子药材中栀子苷的含量测定[J].华西药学杂志，2003，18(5)：374.
       
       [3] 唐光明，陈学松，刘慧妍.HPLC法测定中药退黄外洗液中栀子苷的含量[J].中国当代医药，2009，16(14)：137.
       
       [4] 于晓蕾，张善勇，窦希波.复方栀黄片及栀子中栀子苷的含量测定[J].齐鲁药事，2006，25(8):477.