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       【摘要】 
       目的研究证实复方茶色素的耐缺氧作用，为其应用开发提供实验依据。方法采用小鼠常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒小鼠存活时间和急性脑缺血性缺氧实验观察复方茶色素的耐缺氧作用。结果复方茶色素能明显延长小鼠常压缺氧、亚硝酸钠中毒实验和急性脑缺血性缺氧实验的存活时间。结论复方茶色素具有提高缺氧耐受力的功能。
       【关键词】  复方茶色素; 耐缺氧
       处于缺氧状态的人群比例日益增多，尤其是心脑血管系统处于亚健康状态的人群更是超过1亿，并呈快速增长的趋势。而目前耐缺氧功能保健食品，主要以食品添加剂、天然成分及中药提取物为主，主要面对脑力劳动繁重、获得氧的能力下降等人群。茶色素是新一代预防和治疗心血管疾病、脑血管病、血管性老年痴呆等病的有效药物，具有扶本培正、活血化淤、宣痹通脉、益气养心作用[1]。国内已有茶色素制剂防治心脑血管等疾病及耐缺氧保健作用的研究应用，但未见按中医药原理组方、用于缺血性中风的养护方面的复方茶色素耐缺氧功能保健食品。本文复方茶色素是针对缺血性中风亚健康人群的需求、依据中医中药原理及缺血性脑中风的发病机制，以益气活血为法，选用食用茶色素及红花、西洋参等药食两用的中药组成的处方，验证其耐缺氧功能，为进一步开发利用该处方提供实验依据。
       1 材料
       1.1 受试物菊科植物红花Carthamus tinctorius L.、西洋参Panax quinquefolius L.等购自药材公司;茶色素(购自无锡市世纪生物药业有限公司,食品添加剂), 诺迪康胶囊(四川诺迪康威光制药有限公司，生产批号为090607)为红色空心硬质胶囊，除去胶囊壳为棕黑色颗粒及粉末作为阳性药供实验用，其推荐量为每人每天0.84g。
       1.2 动物昆明种小鼠,体质量(22±2)g,由南京中医药大学实验动物中心提供,实验动物饲养许可证号:SYXK(苏)2007-0030。
       2 方法[2]
       2.1 样品制备 处方各药物(除茶色素)用10倍量水煎煮3次,水提液浓缩后加茶色素,得1.87 g生药/ml复方茶色素样品。
       2.2 耐缺氧功能实验
       2.2.1 常压耐缺氧实验将24只小鼠随机分为对照组、阳性药组和药物组，各组小鼠连续灌胃10 d,其中对照组给予等体积生理盐水，于末次灌胃后1 h ,将各组小鼠分别放入盛有20 g 钠石灰的250 ml 磨口广口瓶内(每瓶1 只) ,用凡士林盖严,使之不漏气,立即计时,以呼吸停止为指标,观察小鼠因缺氧而死亡的时间。
       2.2.2 亚硝酸钠中毒存活实验将24只小鼠随机分为对照组、阳性药组和药物组，各组小鼠连续灌胃10 d ,于末次灌胃后1 h ,各组小鼠均腹腔注射亚硝酸钠溶液240 mg/ (kg BW) (0. 1ml/ 10g) ,立即计时,记录小鼠存活时间。
       2.2.3 急性脑缺血性缺氧实验将24只小鼠随机分为对照组、阳性药组和药物组，各组小鼠连续灌胃10 d ,于末次灌胃后1h ,各组小鼠纵向切开颈部皮肤,分离出双侧颈总动脉,并用丝线同时结扎小鼠双侧颈总动脉后,立即开始记录小鼠的存活时间。
       2.3 统计学处理对实验数据进行方差分析,各剂量组与对照组的实验结果以Dunnett T 检验进行比较。
       3 结果
       3.1 对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响 结果见表1。与对照组相比，药物组有显著性差异(P<0.05)，阳性药组无显著差异(P>0.05),提示药物组能显著延长小鼠常压耐缺氧存活时间。
       3.2 对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响 结果见表2,与对照组相比，药物组、阳性药组有显著性差异(P<0.05)，提示药物组和阳性药组均能显著延长小鼠亚硝酸钠中毒后存活时间。表1 对小鼠常压耐缺氧存活时间的影响表2 对小鼠亚硝酸钠中毒存活时间的影响
       3.3 对小鼠结扎双侧颈动脉存活时间的影响 结果见表3,与对照组比较，药物组、阳性药组有显著性差异(P<0.01)，提示药物组及阳性药组均可延长小鼠结扎双侧颈动脉后存活时间。表3 对小鼠急性脑缺血性缺氧存活时间的影响
       4 讨论
       本实验根据卫生部《保健食品功能学评价程序与检验方法规范》[2]，用常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验评价该复方茶色素缺氧耐作用，结果显示，该复方茶色素能显著延长常压缺氧、亚硝酸钠中毒存活时间，对延长脑缺血性缺氧存活时间更显著。
       目前市场上耐缺氧保健功能食品主要是面对获氧能力较低人群的鲨烯。红景天属于景天科珍贵药用植物,《本草纲目·草部》注为“草本上品”, 具有扶正固本、补气养血等功效[3]，能够通过调节机体能量消耗、代谢的紊乱、中枢神经系统和内分泌系统的功能失调, 起到抗疲劳，耐缺氧的作用[4]，与本处方的功能作用相近，故本实验选用以红景天为原料的诺迪康胶囊作为阳性药。结果表明，在延长常压缺氧和脑缺血性缺氧的存活时间方面，该复方茶色素较阳性药作用更显著。
       茶色素是由茶叶中多元酚类及其衍生物的混合物,它由于具有抗氧化、清除自由基、调血脂、预防血管粥样硬化等功能受到国内外的青睐，并争相开发功能保健食品[5]。茶色素能明显增加脑缺血和脑缺血/再灌注操作时局部脑组织血流量、减轻脑水肿程度、保护大脑皮质神经元等作用，部分作用与尼莫地平作用相仿。其治疗冠心病的作用机制，在于提高超氧化物歧化酶(SOD)的活力,降低丙二醛(MDA)含量，削弱脂质过氧化作用,清除自由基,增强供氧和供血能力[6]。红花黄色素能改善心肌能量代谢，缓解心肌缺氧性损伤[7]，西洋参具有抗心肌缺血、抗心律失常、抗休克、抗氧化、调血脂、防动脉粥样硬化及保护心肌等多方面的药理作用[8]。以茶色素为君药的具有益气活血作用的复方茶色素，经实验证实有耐缺氧尤其是急性脑缺血性缺氧的功能，这为进一步研制开发出具有中医药特色的、预防养护缺血性中风的耐缺氧保健食品提供了实验依据。
       【参考文献】
         　[1] 中华医学会茶色素推广中心.中国茶色素临床科研论文专辑[C].1998：3.
       
       [2] 中华人民共和国卫生部. 保健食品功能学评价程序和检验方法[S] .2003：94.
       
       [3] 贾建昌.红景天抗疲劳作用机理的研究进展[J].甘肃中医,2005,18(11): 45.
       
       [4] 龚小军,陈素红,吕圭源.红景天“益气活血”功效相关药理作用研究进展[J].安徽医药，2008，12(4)：292.
       
       [5] 葛 尧,陈文伟,贾振宝,等.新型功能性天然色素——茶色素[J].中国食品添加剂, 2008,1 : 51.
       
       [6] 杨晓萍,郭大勇,袁芳亭.茶色素的研究现状与应用[J].茶叶机械杂志, 2002, 4: 123.
       
       [7] 吴 伟,金 鸣,朴永哲,等.红花黄色素缓解大鼠心肌缺血的作用[J].中草药, 2007,37:1373.
       
       [8] 王筠默.西洋参药理作用研究的最新进展[J].中国药理与临床，2001，17(4):46.