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       【摘要】 
       目的优选菟丝子盐炙的最佳炮制工艺。方法紫外分光光度法测定菟丝子中总黄酮的含量为指标量，采用L9(34)正交实验设计法对菟丝子炮制工艺进行优选。结果优选出最佳盐炙工艺为：盐浓度3%，闷润2 h，在130℃下炒炙3min。结论优选出的菟丝子盐炙工艺合理可行。
       【关键词】  菟丝子; 炮制; 盐炙; 正交实验
       菟丝子始载于《神农本草经》，列为上品，是常用补益中药，具有补肾益精，养肝明目，安胎之功效[1]，其主要成分有黄酮、多糖、糖苷、氨基酸及微量元素等[2]。由于其质地坚硬，不利于粉碎和煎煮出有效成分，故临床多以炮制品入药。菟丝子历代炮制方法有黄精汁浸、盐炒、酒蒸、酒浸炒、清炒等十余种。现代研究也取得一定进展，张素茂[3]以浸出率为指标研究高压蒸煮法炮制菟丝子的可行性。曾诠[4]以总黄酮为指标，比较了盐炙、酒炙、炒黄3种炮制方法。李波[5]用正交设计以总黄酮为指标优选了菟丝子黄酒炮制工艺。田树革[6]对菟丝子盐炙品及100～160℃之间的烘制品中黄酮及多糖含量进行了比较研究。黄继全[7]对菟丝子的生品、不同方法炮制品的水浸出物做了比较研究。张德昌等[8]对药典中菟丝子所规定的“盐炙法”炮制提出商榷,认为“酒炙法”比“盐炙法”更具临床实用意义。现在《中国药典》收载的盐炙炮制方法为主流炮制工艺，但是仅有菟丝子盐炙的要求和鼓起、香气等经验指标，没有其盐炙饮片客观科学的炮制工艺和质量标准。本文采用正交设计优化菟丝子盐炙工艺，为合理利用其炮制品提供依据。
       1 器材
       UV-紫外可见分光光度计;DF-Ⅱ集热式磁力加热搅拌器;电磁炉;对照品：购自药品生物制品检定所;市售盐;药材由张垣中药饮片公司提供。
       2 方法与结果
       2. 1 含量测定方法的考察
       2. 1. 1 含量测定方法精密称取60℃干燥的样品粉末(过80目筛)1.5 g于索氏提取器中，加80 ml乙醇回流3 h，滤过，滤液用乙醇定容至100 ml，摇匀，作为供试品溶液。另精密称取105℃干燥至恒重的芦丁对照品10.4 mg置50 ml容量瓶中，加乙醇适量，稍加热助溶，定容至刻度，摇匀，作为对照品溶液。按照紫外-可见分光光度法[9]实验，精密吸取供试品溶液1.0 ml，置10 ml容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min;加入10%硝酸铝溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min，加入4%氢氧化钠溶液10 ml，再用水稀释至刻度，摇匀，放置15 min， 502 nm处测定吸收度，代入线性方程计算含量。
       2. 1. 2 标准曲线的绘制及线性范围考察精密吸取对照品溶液0.0，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0 ml与3.5 ml分别置10 ml量瓶中，按“2. 1. 1”含量测定方法项下测定法操作。结果表明芦丁在20.8～72.8 μg/ml范围内，其量与对应的浓度呈良好的线性关系。以芦丁对照品浓度(X)为横坐标，吸收度(Y)为纵坐标进行回归，所得线性方程是Y =0.011 X +0.035 2，r=0.999 1。结果见表1。表1 标准曲线实验结果
       2. 1. 3 精密度实验精密量取一份对照品溶液，502 nm处连续测定吸收度6次。结果见表2。表2 精密度实验结果
       2.1.4 重复性实验分别精密称取同批号生品5份，按“2.1.1”项下含量测定方法项下测定5份样品中芦丁含量。结果见表3。表3 重复性实验结果
       2.1.5 样品溶液稳定性考察将一份样品溶液在规定时间测定。结果表明样品溶液在75 min内稳定性良好。结果见表4。　　表4 样品溶液稳定性实验结果
       2.1.6 回收率实验精密量取已知含量的样品9份各1.0 ml, 置10 ml容量瓶中，分别按下表低、中、高3个用量,精密加入对照品溶液, 按“2. 1. 1”含量测定方法项下制备样品,测定。结果见表5。表5 回收率实验结果
       2. 2 炮制方法取净菟丝子药材90 g，每份加不同浓度的食盐水溶液闷润(按照每100 g药材用食盐2 g的比例加入相同的盐量，然后用不同体积的水溶解制备成不同浓度的食盐水)、闷润不同时间，待盐水吸尽后，置于电磁炉中炒至规定的时间后，取出放凉，密封好，备用。
       2.3 炮制工艺研究考察因素及其水平：菟丝子盐炙工艺优化，选择盐浓度，闷润时间，炒制温度，炒制时间为考察因素,各因素按常规选择3水平,因素与水平确定。见表6。表6 因素与水平考察实验与结果：按L9(34)正交表设计方案进行实验,以总黄酮含量为指标进行方差分析,总黄酮含量测定按含量测定方法项下测定。结果见表7～8。表7 菟丝子盐炙工艺优化　　表8 正交实验方差分析表由表7中极差R值大小显示,各因素作用主次为B>A>D>C;从表8方差分析中可见因素B对总黄酮含量有显著影响，且B2>B1>B3。因素A、C、D对总黄酮含量无显著影响;从表7中直观分析可得最佳工艺为B2A1D2C1。分析结果表明,最佳炮制条件为：盐浓度3%,闷润2h，130℃炒3 min。
       2.4 验证实验取120 g菟丝子药材3份, 用80 ml食盐水(食盐浓度3%)闷润2 h，置炒制容器内，130℃炒3 min，取出，备用。测定总黄酮含量为2.72%。
       3 讨论
       本研究采用正交设计，以总黄酮为指标优化了菟丝子最佳盐炙工艺，经验证结果比正交设计表中9种炮制方案均高，说明本工艺是可行的，可确证最佳炮制工艺为3%食盐浓度(辅料比2%)闷润2 h，置炒制容器内，130℃炒3 min。因为药典中记载盐炙工艺辅料比为2%，故把食盐浓度作为主要考察因素之一。正交实验表明食盐浓度越高越有利于总黄酮含量提高，但是不能过高，否则易盐析造成不利影响。使用盐溶液浸润药材的主要作用是改变药性，因此炮制温度也不能过高，时间不宜过长，否则易糊化，达不到炮制目的。
       本研究还发现菟丝子药材经炮制后总黄酮含量比生品高，表明经炮制使药材易于粉碎及有效成分易于煎出。2005版《中国药典》中菟丝子盐炙法炮制品标准仅提到“炒至微鼓起”，并没有确切的指标衡量其标准，本研究把菟丝子有效成分之一作为其炮制品标准衡量的一项指标，可为《中国药典》中菟丝子炮制项的进一步完善提供实验基础，如果能够采用多指标综合制定菟丝子炮制标准将会更加完善，有待进一步研究。
       【参考文献】
         　[1] 南京中医药大学.中药大辞典，第2版[M].上海:上海科学技术出版社,2006:3.
       
       [2] 郭洪祝,李家实.南方菟丝子化学成分研究[J].北京中医药大学学报,2000,23(3):20.
       
       [3] 张素茂.高压蒸煮法炮制菟丝子[J].中国中药杂志,1992,17(9):536.
       
       [4] 曾 诠,杜文清,吴洪元,等.菟丝子炮制研究[J].中草药,1998,29(10):667.
       
       [5] 李 波,金承勇.正交法优选菟丝子黄酒炮制工艺[J].中成药,2003,25(1)∶43.
       
       [6] 田树革,周晓英,肖新芳,等.菟丝子及不同炮制品中有效成分含量的研究[J].新疆医科大学学报,2001,24(1):68.
       
       [7] 黄继全.菟丝子炮制工艺探讨[J].江西中医学院学报,2006, 18(1):36.
       
       [8] 张德昌,曹谷珍.对药典中菟丝子炮制方法的商榷[J].中医药研究,2001,17(1):50.
       
       [9] 国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社,2005:附录ⅤA,附录28.