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       【摘要】 
       目的探讨小叶榕水提物、醋酸乙酯萃取物镇咳、祛痰、抗炎的作用。方法采用小鼠喷雾致咳法、小鼠酚红祛痰法、小鼠耳肿胀抗炎法，考察了小叶榕在镇咳、祛痰、抗炎相关模型中的作用。结果小叶榕水提物、醋酸乙酯萃取物均有明显的镇咳、祛痰和抗炎作用，且从整体趋势来看，醋酸乙酯萃取物的作用强于水提物。结论小叶榕具有明显的镇咳、祛痰、抗炎作用，醋酸乙酯部位可能是小叶榕镇咳、祛痰和抗炎的有效部位。
       【关键词】  小叶榕; 镇咳; 抗炎; 祛痰
       小叶榕为桑科(Moraceae)榕属(Ficus)植物榕树Ficus microcarpa Linn.f.的干燥叶，主要分布在热带亚热带，产于印度、马来西亚、中国、越南等国。在我国主要分布在广东、广西、海南、福建、贵州等地，是岭南常用中草药，始载于《南方草木状》，有着广泛民间用药基础;其性味淡、凉，具有止咳化痰、清热祛湿、活血散瘀的功效，民间用于治疗跌打损伤、支气管炎、流感、百日咳、扁桃体炎、菌痢、肠炎、目赤、牙痛等症[1～3]。本文对小叶榕水提物、醋酸乙酯部位的镇咳、祛痰、抗炎等作用进行了初步的比较。现报道如下。
       1 材料与仪器
       1.1 动物清洁级ICR 小鼠，雄性，体质量(20±2)g，由北京维通利华动物技术有限公司提供，许可证编号：SCXK(京)2007-0001。
       1.2 药品与试剂枸橼酸喷托维林片(咳必清)，天津药业焦作有限公司产，批号0701C421;盐酸氨溴索片(沐舒坦)，勃林格殷格翰国际公司产，批号784229;阿司匹林泡腾片，阿斯利康制药有限公司产，批号0709053;苯酚红，上海三爱思试剂药学公司产，批号：20000225。取0.5 g 苯酚红用1N (即0.4%)NaOH 15ml溶解后用双蒸水85 ml稀释、过滤，制成酚红溶液;羧甲基纤维素钠(CMC-Na)，广东省汕头市西陇化工厂产，批号：0411232，蒸馏水配制成0.5%溶液;NaCl、二甲苯、NaOH，氨水，乙醇、醋酸乙酯等均为分析醇。
       1.3 仪器TU-1810APC型紫外分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司产品;400R 低温离心机，德国Heraeus公司产品;YLS-8A多功能诱咳引喘仪，山东医学科学院设备站产。
       2 方法
       2.1 样品制备
       2.1.1 小叶榕水提物小叶榕粉末(过40 目筛)，加10倍量蒸馏水，加热回流提取3 次，2 h/次，过滤，合并滤液，浓缩蒸干，得干膏，干膏以0.5%CMC-Na溶液溶解。
       2.1.2 小叶榕醋酸乙酯部位小叶榕粉末(过40目筛)，加10倍量95%乙醇，加热回流提取3 次，2 h/次，过滤，合并滤液，浓缩蒸干，干膏以适量水分散后，分别以石油醚、氯仿、醋酸乙酯依次萃取，萃取液分别浓缩蒸干，真空干燥得干膏。取醋酸乙酯部位干膏以0.5%CMC-Na溶液溶解。
       2.2 镇咳实验小鼠常规饲养2～3 d后，随机分为空白对照组，咳必清组(给药量0.000 5 g/kg)，水提物高、中、低剂量组和醋酸乙酯部位高、中、低剂量组。各组动物连续口服给药7 d，1次/d，给药量0.2 ml/10 g。末次给药60 min后将小鼠置于多功能诱咳引喘仪中，25%浓氨水喷雾30 s，记录自喷雾结束至出现咳嗽的时间，即为潜伏期，超过90s的按90s计。连续记录2 min内小鼠的咳嗽次数，咳嗽标准为小鼠出现快速的腹肌收缩，张大嘴，或伴有咳嗽声。
       2.3 祛痰实验取一定量的酚红，精密称定，以5%NaHCO3溶解，制成每毫升含酚红100 μg的溶液。然后依次稀释，分别配成每毫升含1，2，3，4，5，6，7，8，9 μg酚红的溶液。紫外分光光度计，波长λ=546nm 处检测OD 值，以酚红含量为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。动物常规饲养2～3 d后，随机分为空白对照组，沐舒坦组(给药量0.27 mg/10 g)，水提物高、中、低剂量组和醋酸乙酯萃取物高、中、低剂量组。各组小鼠连续口服给药7 d，1 次/d，给药量0.2 ml/10g。末次给药30 min后，小鼠颈背部皮下腹腔注射0.6%酚红生理盐水0.5 ml/只，注射30 min后，脱颈椎处死小鼠，小心打开胸腔，完整剥离双侧肺脏，置于盛有2 ml生理盐水的试管中，振荡20～30 min，加入1mol/L氢氧化钠 0.2 ml，混匀，使溶液成碱性，紫外分光光度计在λ=546 nm处测光密度，根据酚红标准线计算酚红排泌量。酚红的标准曲线及回归方程见表1。表1 酚红线性曲线及方程
       2.4 抗炎实验动物常规饲养2～3 d后，随机分为空白对照组，阿司匹林组(0.003 g/10 g)，水提物高、中、低剂量组和醋酸乙酯萃取物高、中、低剂量组。各组小鼠连续口服给药7 d，1 次/d，给药量0.2 ml/10 g。末次给药30 min后，小鼠右耳前后两面涂布致炎剂二甲苯，体积为0.02 ml/只，左耳不做任何处理。30 min后，脱颈椎处死小鼠，5 mm打孔器在小鼠左右耳朵相同位置处打孔，获得鼠耳片，称重，记录小鼠左右耳片重量，按下述公式计算肿胀度与肿胀抑制率。肿胀度=(右耳重-左耳重)/左耳重肿胀抑制率(%)=(空白对照组肿胀度-给药肿胀度)/空白对照组肿胀度×100%
       2.5 统计方法运用SAS for Windows 8.1软件进行数据统计分析，数据均以±s表示，组间比较采用单因素方差分析或秩和检验。
       3 结果
       3.1 小叶榕不同部位镇咳作用的实验研究小叶榕水提物、醋酸乙酯部位对25%浓氨水引起的小鼠咳嗽的镇咳作用结果见表2。小叶榕水提物和醋酸乙酯部位均能够明显延长小鼠咳嗽反应的潜伏期(P<0.01)，并表现出一定的剂量依赖性。小叶榕水提物和醋酸乙酯部位中、高剂量能明显减少小鼠2min内咳嗽次数(P<0.01)。小叶榕醋酸乙酯部位的镇咳作用优于水提物。醋酸乙酯部位的高剂量较水提物能明显延长小鼠咳嗽反应的潜伏期(P<0.01)，显著减少小鼠的咳嗽次数(P<0.01)。表2 小叶榕对浓氨水致小鼠咳嗽反应的影响
       3.2 小叶榕不同部位祛痰作用的实验研究小叶榕水提物和醋酸乙酯部位各剂量组均能不同程度地提高小鼠呼吸道的酚红排泌量，结果见表3。但小叶榕水提物只有高剂量组与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)，而醋酸乙酯部位高、中、低3个剂量组均与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)，且小叶榕醋酸乙酯的中、高剂量增加小鼠呼吸道酚红排泌的作用要接近或优于沐舒坦(P<0.01)，说明小叶榕醋酸乙酯部位的祛痰作用应优于其水提物。表3 小叶榕对小鼠气管酚红排泌的影响
       3.3 小叶榕不同部位抗炎作用的实验研究实验结果见表4。小叶榕水提物与醋酸乙酯部位的各剂量组能不同程度地降低小鼠的耳肿胀程度(P<0.05)，并显示出一定的剂量依赖性。但小叶榕的两种提取物在抗炎方面无明显的差异，其作用相当。表4 小叶榕对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
       4 讨论
       小叶榕具有悠久的使用历史和明确的临床疗效，已被制成胶囊、片剂、颗粒剂等多种剂型供临床使用。小叶榕中主要含黄酮、三萜类、齐墩果酸、脂肪族化合物和甾体化合物等。本研究中发现小叶榕的水提物及醋酸乙酯部位均有明显的镇咳、祛痰和抗炎作用。小叶榕醋酸乙酯部位的药效作用强于其水提物，且醋酸乙酯萃取部位中主要含黄酮类化合物，故推测黄酮类成分可能是小叶榕镇咳、祛痰、抗炎的主要有效成分，对此深入研究，将有助于依此确立小叶榕的质量标准，为临床安全用药提供技术保障。
       【参考文献】
         　[1] 江苏新医学院.中药大辞典，下册[M].上海:上海科技出版社，1988:2529.
       
       [2] 国家中医药管理局.中华本草，第2册[M].上海:上海科技出版社，1999:495.
       
       [3] 叶荣科，张德志，周宏兵，等.小叶榕树叶总黄酮水提醇沉工艺研究[J].广东药学院学报，2003，19(4):330.