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       【摘要】 
       目的考察芍药苷在不同pH条件下的水解情况。 方法Diamonsil-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液(15∶85);检测波长为230 nm;进样量为10 μl;柱温为室温，流速为1.0 ml·min-1。结果芍药苷对照品在0.021 5～0.215 μg范围内,进样量与峰面积间呈良好的线性关系，r=0.999 9，并得到不同pH条件下的水解动力方程。结论芍药苷的水解符合一级动力学模型。在不同pH条件下，芍药苷的水解速度不同。
       【关键词】  芍药苷; 水解动力学; 高效液相色谱
       Study on Hydrolysis Kinetics of Paeoniflorin
       LIU Qian1, LIU Yonggang2, LI Jian1*, LA Wanying1
       (1.North China Coal Medical University, Tangshan 063000, China;2.College of Traditional Chinese Pharmacology, Beijing University of Traditional Chinese Medicine, Beijing 100102, China)
       Abstract：ObjectiveTo investigate the hydrolysis kinetics of Paeoniflorin in different pH values.MethodsDiamonsil-C18 column(250mm×4.6mm,5μm) was used with the use of the acetonitriler-0.1%formic acid (15∶85)as the mobile phase, the flow rate was 1.0 ml·min-1 and the detection wavelength was set at 230 nm.ResultsPaeoniflorin was well separated,the linear range of paeoniflorin was 0.021 5～0.215 μg (r=0.999 9). Hydrolysis kinetics equations in different pH values was obtained.ConclusionThe degradation follows pseudofirst-order kinetics. Hydrolysis rate is different in various pH values.
       Key words：Paeoniflorin; Hydrolysis Kinetics; HPLC
       白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗的功能[1]。其主要成分芍药苷(Paeoniflorin)，具有免疫调节、抑制肿瘤、舒张平滑肌细胞、促进造血细胞增殖等方面的作用[2]，而且能明显降低链脲霉素诱发的糖尿病小鼠的血糖[3]。对芍药苷的药理作用及其化学性质已有较多研究，但芍药苷的水解动力学和不同pH下，其水解动力学的变化未见报道。本实验对芍药苷的水解动力学及不同pH值对水解的影响进行了研究，为含有芍药苷的中药及复方的合理提取方法的选择提供依据。
       1 仪器与试剂
       仪器 岛津20A系统，含在线真空脱气机、低压四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器、LCsolution色谱工作站。芍药苷(中国药品生物制品检定所110753-200212)。乙腈(美国 Fisher公司)，甲酸(分析纯)，水为二蒸水，醋酸盐、磷酸盐缓冲溶液，临用现配。
       2 方法与结果
       2.1 液相色谱条件色谱柱为Diamonsil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为乙腈-0.1%的甲酸水溶液(15∶85);流速为1ml·min-1，检测波长230 nm。
       2.2 标准品溶液的制备精密称取一定量的芍药苷，用甲醇配置成每毫升含0.1mg的溶液，即得。
       2.3 供试品溶液的制备精密称取对照品，少量甲醇溶解后分别加入pH 3.0，5.0，7.0，9.0的缓冲溶液至刻度，恒温加热回流，并在不同的时间点(0.5,1，2，4，6，8h)取样，0.45 μm的滤膜过滤，备用。
       2.4 线性关系的考察精密量取对照品溶液2.0，4.0，8.0，10.0，20.0 ml，置100 ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。精密量取上述供试品溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，得回归方程为Y=29747.81X+6.892，r=0.999 9。结果表明，芍药苷在0.021 5～0.215μg范围内呈良好的线性关系。芍药苷标准品HPLC图谱见图1。
       图1 芍药苷标准品HPLC图谱
       2.5 精密度分别取芍药苷样品液10 ml 6份，按照实验方法，测定峰面积。其RSD为0.28%。
       2.6 稳定性在常温下取芍药苷样品液在不同时间点(1，2，4，6，8h)取样，测定峰面积，其RSD为0.96%。
       2.7 不同pH下芍药苷的水解动力学方程求算称取一定量的芍药苷4份，按“2.3”项下方法水解，于0.5，1，2，4，6，8h取样，测定芍药苷的峰面积，结果发现不同pH下，In(AUS0/AUS)对t呈线性关系，相关系数均大于0.95，可以推测芍药苷的水解符合准一级动力学模型，对不同pH下的芍药苷的水解动力学方程进行求算。结果见表1。芍药苷水解的HPLC图谱见图2。表1 芍药苷在不同pH下的水解动力学方程
       3 讨论
       不同pH值对芍药苷水解的影响，在实验过程中，设置4个不同的pH(3,5,7,9)，结果发现，芍药苷水解在酸性条件下水解更快，该结果对于含有芍药苷的中药及复方的提取有一定的指导意义。
       该实验结果与白芍炮制的相关试验结果相吻合，本实验从另外一个方面证明了炮制可改变中药的性质[4]。
       【参考文献】
         　[1] 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部[S].北京:化学工业出版社，2005:68.
       
       [2] 胡 南,许惠玉,陈志伟,等. 芍药苷的药理学研究进展[J].齐齐哈尔医学院学报,2007,28(9): 1093.
       
       [3] Hsu FL, Lai CW, Cheng JT. Antihyperglycemic effects of paeoniflorin and 8-debenzoylpaeoni -florin, glucosides from the root of Paeonia lactiflora[J].Planta Med, 1997，63(4):323.
       
       [4] 时维静,储明明,谭志静.不同炮制方法对白芍中芍药苷含量的影响[J].中国中医药信息杂志，2008,15(12):49.