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       【摘要】 
       目的对红树植物红海榄中多糖的提取及其组成进行研究。方法红海榄叶经热水浸提、Sevage法脱蛋白等方法得到多糖；经完全酸水解，糖腈乙酸酯衍生化，并用红外光谱仪、气质联用仪对其结构和组成进行了研究。结果红海榄多糖由赤藓糖、D-阿拉伯糖和葡萄糖组成，它们的摩尔比为5∶1∶17。结论红海榄多糖为杂多糖。
       【关键词】  红海榄； 多糖； 提取； 组分
       多糖是存在于自然界的醛糖和(或)酮糖通过糖苷键连接在一起的聚合物，它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子，是维持生命活动正常运转基本物质之一。近年来,国际上对药用红树植物的化学成分及其药理研究表明，红树植物具有抗艾滋病、抗肿瘤、抗氧化等活性［1］。尽管红树植物在世界上分布广泛,含有大量活性先导化合物可治疗人类重大疾病,但这一类植物资源在某些方面并未真正得到研究、开发和利用,尤其是其药用价值未得到应有的重视。本实验对红树植物红海榄中的多糖进行提取并对其组成进行了研究。
       1  材料与仪器
       1.1  原料红海榄叶（采自湛江东海岛），洗净剪碎，置于通风处阴干，备用。
       1.2  试剂95％乙醇；无水乙醇；氯仿；正丁醇；丙酮；无水乙醚；硫酸；碳酸钡；吡啶；盐酸羟胺；乙酸酐，以上试剂均为分析纯。
       1.3  仪器E-5299旋转蒸发仪（巩义市予华仪器有限责任公司）；SHB-B95A型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；GCMS-QP2010气相色谱质谱连用仪（岛津制作所）；HH-S2系列恒温水浴锅（江苏省全坛市环宇科学仪器厂）；FTIR-8400S型红外光谱仪（日本岛津公司）；ESJ120-4型电子天平（沈阳市龙腾电子有限公司）；202-2型干燥箱（上海市实验仪器总厂）；GSP-84-02型磁力恒温搅拌器（山东电讯七厂）。
       2  方法
       2.1  多糖提取称取粉碎、干燥好的红海榄叶150 g，加入1 500 ml蒸馏水，超声处理20 min后加热到90 ℃，热水浸提3次，过滤，合并，得棕色滤液。用旋转蒸发仪在浓缩滤液至50 ml，抽滤去沉淀，加入3倍体积的95％乙醇沉淀多糖，于冰箱放置过夜，得棕色絮状物，离心收集沉淀。
       2.2  Sevag法去蛋白［2］Sevag试剂的配制：用氯仿与正丁醇以4∶1混合。
       
       上述沉淀加水溶解，即得棕色溶液，加入溶液1/3倍体积的Sevag试剂，剧烈振荡至无白色絮状物析出，然后离心，除去水相与有机相交界处的变性蛋白，剩余液体再加入200 ml无水乙醇，充分振荡摇匀，于冰箱静置24 h，得棕色絮状物。离心收集沉淀，沉淀经无水乙醇、丙酮、无水乙醚洗涤两次脱去脂肪和色素，干燥，得棕色粗多糖1.5 g。
       
       2.3  红外光谱法（IR）鉴定多糖采用KBr压片制样,在4 000～400 cm-1区间内用红外光谱仪扫描IR吸收。
       2.4  多糖水解［3］称取30 mg粗多糖，加入5 ml 30 mmol/L的硫酸溶液，封管，超声片刻，至多糖完全溶解，100 ℃恒温水浴振荡2 h。将试管置于烘箱中于110 ℃反应6 h后冷却至室温，加BaCO3粉末中和、离心、干燥得到水解后的淡黄色单糖混合物0.0136 g。
       2.5  糖腈乙酸酯衍生物的制备称取10 mg单糖样品和10 mg盐酸羟胺，用20 ml吡啶溶解，封管，95 ℃恒温水浴振荡40 min后冷却至室温，加入0.6 ml乙酸酐，封管，95 ℃恒温水浴振荡40 min，冷却至室温，得茶色单糖腈乙酸酯衍生物，待测。
       2.6  单糖衍生物的GC/MS分析
       2.6.1  色谱条件RTX-5石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm)，柱温：80 ℃，汽化室温度：280 ℃，载气为高纯度氦气，进样量1 μl，升温程序：起始温度80 ℃，保留时间2 min，每分钟5 ℃升温到260 ℃，保留1 min。
       2.6.2  质谱条件离子源为EI源，灯丝电流0.6 mA，离子源温度200 ℃，电离能量70 eV，接口温度250℃，电子倍增管电压1.20 kV，扫描周期0.5 s，扫描范围30.00～400.00 m/z，溶剂延迟3 min。
       3  结果
       3.1  多糖红外光谱分析结果红海榄多糖的红外光谱如图1所示，从图谱中可以看出红海榄多糖具有以下结构特征：在 3 600～3 200 cm-1的一个强峰是O-H的伸缩振动。在3 000～2 800 cm-1的一组吸收峰是糖类C-H的伸缩振动引起的，1 400～1 200 cm-1的不太尖的吸收峰是C-H的变角振动，这两组吸收峰是糖类的特征吸收峰。1 665～1 625 cm-1间吸收峰是糖的水化物的吸收峰。1 200～1 000 cm-1间比较大的吸收峰是由两种C-O伸缩振动所引起的，其中一种是属于C-O-H的，另一种是糖环的C-O-C。该样品具有典型的多糖特征峰。
       3.2  单糖衍生物GC-MS分析结果将糖腈乙酸酯衍生物进行GC-MS分析，经计算机内NIST02质谱数据库检索得到分析结果如表1所示。表1  单糖衍生物GC/MS分析结果（略）
       
       赤藓糖，分子式HOCH2（CHOH）2CHO，自然界尚未发现游离的赤藓糖；D阿拉伯糖又称果胶糖，分子式CH2OH(CHOH)3CHO，自然界D阿拉伯糖很少见，仅在某些细菌多糖中存在，D-阿拉伯糖通常与其他单糖结合，以杂多糖的形式存在于胶、半纤维素、果胶酸、细菌多糖及某些糖苷中；葡萄糖是己醛糖，分子式CH2OH(CHOH)3COCH2OH，是自然界分布最广泛的单糖。
       4  讨论
          
       研究结果表明该多糖是一杂多糖，由赤藓糖、D阿拉伯糖和D葡萄糖组成，它们的摩尔比为：5∶1∶17,该多糖为杂多糖。
       【参考文献】
         　［1］王友绍,何磊.药用红树植物的化学成分及其药理研究进展［J］.中国海洋药物,2004,2:26.
       
       ［2］张晓静,刘会东.植物多糖提取分离及药理作用的研究［J］.时珍国医国药,2003,14(8):495.
       
       ［3］季宇彬.中药多糖的化学与药理［M］.北京:人民卫生出版社，2005：5.