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胡芦巴降脂活性部位的筛选
作者:隋宏,容春娟,王文苹    
作者单位:(宁夏医科大学药学院,宁夏 银川 750004)

《时珍国医国药》 2010年 第6期

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       【摘要】 
       目的对传统中药胡芦巴的降血脂有效活性部位进行初步分离和筛选,初步确认胡芦巴降血脂作用的活性部位。方法采用喂饲高脂饲料的方法建立大鼠高血脂模型;采用乙醇回流提取法分离得到胡芦巴总皂苷供试液;残渣挥干乙醇,加水采用超声波提取法得到胡芦巴多糖供试液;以胡芦巴水提液、总皂苷、多糖、辛伐他汀灌胃治疗;各给药组于第21天摘除眼球采血,测定高血脂大鼠的血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C) 。结果与模型组比较 ,胡芦巴水提液组、总皂苷组和多糖组的TG,TC,LDL-C明显降低( P<0.05~0.01) , HDL-C变化不大; 胡芦巴水提液组的TG,TC,LDL-C降低更显著(P<0.01)。结论胡芦巴总皂苷和总多糖均有一定的降血脂作用,水提液降脂效果更为显著。
       【关键词】  胡芦巴; 高血脂; 活性部位; 总皂苷; 多糖
       高脂血症是动脉粥样硬化及心脑血管疾病的最重要的危险因素[1] ,极大危害着人类的健康。目前西药降血脂药物仍存在一定的副作用,例如肝脏功能损害、胃肠道功能紊乱、肌肉痛、横纹肌溶解症等[2]。因此,寻找一种安全有效的降血脂药是国内外心脑血管研究人员关注的焦点。
       
       胡芦巴 Trigonella foenum-graecum系豆科蝶形花亚科植物胡芦巴的成熟干燥种子,又名香豆子, 胡芦巴是一种集食用、药用、香料、饲料、工业原料于一体的经济作物,是宁夏地道药材。国内外研究表明胡芦巴的水提物有很好的降血脂效果,但其降低血脂的活性部位还不明确。
       
       因此,本课题主要是采用SD大鼠建立高血脂模型,初步考察并确定胡芦巴降低血脂的主要活性部位,为胡芦巴的深入研究和产品开发奠定基础[3]。
       1  材料与仪器
       1.1  动物清洁级SD大鼠60只,体质量180~220 g,雌雄各30只,由宁夏医科大学动物实验中心提供,合格证号:SCXK(宁)2005-001。
       1.2  饲料基础饲料(由宁夏医科大学动物实验中心提供); 高脂饲料由猪油10%,蛋黄15%,奶粉10%,黄豆15%,鱼肝油10滴/100 g)与基础饲料配制而成。
       1.3  试剂与仪器OLYMPUS.AU2700型全自动生化分析仪(日本),UV-2550型紫外可见分光光度计(日本岛津),AEu-210型电子分析天平(日本岛津),KQ-500E型超声波清洁器,RE-52AA型旋转蒸发仪。
       1.4  药物胡芦巴种子(由宁夏伊雪莲大药房提供),经宁夏医科大学药学院生药教研室鉴定为胡芦巴Trigonella foenum-graecum的成熟干燥种子。辛伐他汀片剂(20 mg,山东鑫齐药业有限公司,20090104,由宁夏银川胜利街古方药品超市提供)。
       2  方法
       2.1   供试液的制备
       2.1.1   胡芦巴种子的处理将胡芦巴种子洗净,文火炒至深褐色,粗粉碎后,过10目筛。
       2.1.2   胡芦巴水提液供试液的制备取炒制的胡芦巴粗粉,用水煎煮3次,分别为60,45,30 min,4层纱布过滤,合并滤液,水浴浓缩成 640 ml的药液,冷藏备用。
       2.1.3   总皂苷供试液的制备根据本课题组前期实验,选用总皂苷提取的优化工艺制备总皂苷供试液。取炒制的胡芦巴粗粉,加入11倍的75%乙醇,回流提取3次,120 min/次,滤纸过滤,合并滤液,水浴浓缩至600 ml,冷藏备用。
       2.1.4   多糖供试液的制备根据本课题组前期实验,选用多糖提取的优化工艺制备多糖供实液。取以上醇提后的残渣,挥干乙醇,加入25倍的水,在70℃下超声提取3次,45 min/次,四层纱布过滤,合并滤液,水浴浓缩至600 ml,冷藏备用。
       2.2   动物分组将60只SD大鼠适应性喂养1周,称重并随机分为6组:正常对照组(对照组)8只,高脂饲料组(模型组)12只,胡芦巴水提液组(水提液组)10只,胡芦巴总皂苷组(总皂苷组)10只,胡芦巴多糖组(多糖组)10只,辛伐他汀组(阳性药组)10只。每组雌雄鼠各半。
       2.3  大鼠高血脂模型的建立阴性对照组以普通饲料喂养,其余5组以高脂饲料喂养。连续喂养4周后,每组随机抽取2只,摘除眼球取血,确定建模成功。
       2.4  治疗方法高脂模型建立成功后,各组采用灌胃法给药。于第30天起开始灌胃给药,连续治疗28 d。
       2.5  血液标本的制备及检测于第28天,全部大鼠摘除眼球取血,应用OLYMPUS.AU2700型全自动生化仪酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C),低密度脂蛋白(LDL-C)按Friedewald公式 LDL-C = TC–(0.45* TG + HDL-C)推算。 
       2.6   统计学处理实验数据以±s表示 ,采用 SPSS Statistics 17统计软件包进行统计分析,两样本均数比较采用t检验。方差不齐时两样本均数比较采用t′检验 ,检验水准α= 0. 05。
       3  结果
       
   
       见表1。表1  胡芦巴对高血脂大鼠血脂水平的影响(略)
       
       由表1可以得出,与正常对照组相比,模型组的TC,TG,HDL-C,LDL-C均明显升高(P<0.05,P<0.01),说明高血脂大鼠模型建立成功;与模型组相比,水提液组的TC、 TG、 LDL-C和辛伐他汀组的TC、 TG、 HDL-C差异有显著性意义(P<0.01);而水提液组的HDL-C差异无显著性意义(P>0.05),说明胡芦巴水提液和辛伐他汀组可显著降低高血脂大鼠的TC和 TG;辛伐他汀组的TG,TC,HDL-C,LDL-C与水提液有显著性差异(P<0.01),说明阳性药组降脂效果更佳;皂苷组和多糖组相比, TC,TG, HDL-C,LDL-C有差异但不显著(P>0.05),说明二者作用相近。
       4  讨论
       
   
       综上所述,胡芦巴水提液和其提取部位(总皂苷和总多糖)均有一定的降脂作用,其中水提液降脂效果更为显著,与辛伐他汀作用相似。实验结果表明,胡芦巴降脂疗效是由总皂苷和总多糖两者产生的协同作用。
       
       在制备胡芦巴水提液时,总皂苷、总多糖和其它成分均被提取出来,有效成分含量较高,从而使得水提液的降脂效果较为显著。
       
       胡芦巴皂苷与胆盐组成大的胶粒,不易被吸收;胡芦巴中薯蓣皂苷元可以抑制胆固醇的吸收,增加胆固醇的分泌,增加中性胆固醇的粪便排泄;另外胡芦巴胶体在消化道内形成胶体屏障,抑制胆盐吸收,减少肝内循环,因而降低血清胆固醇浓度[4]。
       
       高脂血症是促进动脉粥样硬化和危及人类健康的冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)的主要危险因素之一,降低血脂,可以降低冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病率。另外,血脂的降低已被证实可以减慢已形成的粥样硬化斑块的进展,甚至使其消退,并有可能降低冠状动脉粥样硬化性心脏病的病死率。
       
       胡芦巴现在多做牧草使用,或用于制胶工业,制胶后残渣是用于提取薯蓣皂苷的重要原料,但其降脂作用未能得到有效开发。如果我们进一步研究胡芦巴的降脂机制,开发研究出新的降脂制剂,无疑给广大糖尿病和心血管疾病患者带来福音。目前胡芦巴已被收入国家保健食品原料用药目录。采用现代化技术对胡芦巴的降脂作用进行深入研究,具有非常广阔的应用前景。
       【参考文献】
          [1]贾玉杰,王颖.脑复康对高脂血症和脂肪肝防治作用的研究[J] .中国病理生理杂志,2000,10 :15.
       
       [2]叶任高,陆再英. 糖尿病内科学,第5 版[M] .北京: 人民卫出版社, 2001:830.
       
       [3]周玖瑶,邓素坚,黄桂英,等.胡芦巴对链佐霉素诱导糖尿病模型大鼠药理研究[J] .中华中医药学刊,2007,25(5):1005.
       
       [4]荆宇, 赵余庆.胡芦巴化学成分和药理作用研究进展[J] .中草药,2003,34(12):1146.

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