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       【关键词】  络石藤；,,紫外分光光度法；,,总黄酮
       摘要：目的对中药络石藤中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于500 nm波长处测定。结果总黄酮在8.4～50.4 μg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为: A=0.006 714 C +0.070 6（r=0.999 7）; 平均加样回收率为96.2% (RSD=1.42%)。结论该方法简便、准确, 可用于络石藤的质量控制。
       关键词：络石藤；  紫外分光光度法；  总黄酮
       Determination of the Total Flavonoids in Chinese Starjasmine Stem by Spectrophotometry
       ZHOU Qun,FU Haiying, BAI Jiawei, LI Li
       (School of Pharmacy, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, China)
       Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of the total flavonoids in Chinese Starjasmine Stem. MethodsThe total flavonoids in Chinese Starjasmine Stem was determined by spectrophotometric method at 500 nm wavelength. ResultsSample size showed a good linear relationship at the range of 8.4～50.4 μg/ml, and the curve was A =0.006 714 C+0.070 6（r=0.999 7）. The average recovery was 96.2% and RSD was 1.42% (n=6).ConclusionThis method is easy and accurate, and can be used for quality control of Chinese Starjasmine Stem.
       Key words：Chinese Starjasmine Stem;  Spectrophotometric method;  Total flavonoids
   
　　络石藤系常用中药，始载于《神农本草经》，列为上品，《中国药典》2000年版规定其来源为夹竹桃科植物络石Trachelospermum jasminoides (Lindl.) Lem. 的干燥带叶藤茎，具有祛风通络、活血消肿的功效，用于风湿痹痛、腰膝酸痛、筋脉拘挛、喉痹、痈肿、跌扑损伤。近年来，有不少研究机构从该植物中分离出多种木脂素、黄酮类化合物；并报道其黄酮类成分抑制黄嘌呤氧化酶活性，木脂素类化合物松弛气管平滑肌、抑制II6等药理活性［1］。最近这些化合物以其显著的抗癌、防癌活性引起医药学界的注意，有望成为癌症化学预防的有效药物［2］。 由于络石藤应用较为广泛，而且具有很高的药用价值，对其进行深入研究应是非常重要的，而查阅资料则显示，目前暂无人对其所含总黄酮含量进行测定。所以我们采用紫外-可见分光光度法对络石藤中所含总黄酮的含量进行了测定, 为其质量控制及进一步的开发利用提供依据。
       　1  器材
       1.1  仪器WF800-D3B紫外分光光度仪(北京瑞利分析仪器公司) ;电子分析天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）; DZX-3型（6020B）真空干燥箱(上海福玛实验设备有限公司)。
       1.2  供试品 络石藤（购自武汉南方大药房，并由华中科技大学同济医学院药学院生药系张长弓副教授鉴定）。
       1.3  试剂芦丁对照品购自中国药品与生物制品检定所, 甲醇、硝酸铝、氢氧化钠、亚硝酸钠等均为分析纯。
       　　2  方法与结果［3］
       2.1  样品溶液的制备将野外采集的络石藤洗净烘干，粉碎机粉成粗粉，备用。取络石藤粗粉约0.2 g，精密称定，置于索氏提取器中，加乙醚适量，加热回流至提取液无色，放冷，弃去乙醚液。再加入90 ml的70%乙醇，加热回流至提取液无色，转移至100 ml量瓶中，用70%乙醇少量洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，摇匀，作为供试样品溶液。
       2.2  对照品溶液的制备精密称取在105℃干燥至恒重的芦丁对照品0.010 5 g, 用甲醇溶解, 定容至50 ml, 摇匀, 配成浓度为0.21 mg/ml的芦丁对照品溶液,备用。
       2.3  测定波长的选择样品溶液按2.4项下显色后用紫外-可见分光光度计进行扫描。扫描范围: 800～400 nm,确定测定波长为500 nm。
       2.4  线性关系考察 精密量取对照品溶液1，2，3，4，5，6 ml，分别置25 ml容量瓶中，加水至6 ml，加入5%亚硝酸钠1 ml，混匀，放置6 min；加入10%硝酸铝1 ml，摇匀，放置6 min，加入氢氧化钠试液10 ml，放置15 min后，加水至刻度，以相应试剂为空白，用紫外-可见分光光度计在500 nm处测吸光度，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。结果见表1。 回归方程为: A =0.006 714C +0.070 6，r=0.999 7。
       表1  制备标准曲线的数据（略）
       2.5  精密度考察精密量取样品溶液3 ml，按2. 4项下方法操作，从“分别置25 ml容量瓶中”起测定样品, 连续测定5次。结果见表2。结果表明，本方法精密度良好。
       表2  精密度实验结果测定（略）
       2.6  重复性考察 平行取络石藤样品6份, 按2. 1项下方法制备样品溶液，再精密量取样品溶液3 ml，按2. 4项下方法操作，在500 nm 处测定吸收度。结果见表3。
       2.7  稳定性考察精密量取样品溶液3 ml， 按2. 4项下方法操作，从“分别置25 ml容量瓶中”起制备样品, 分别于0, 15, 30, 45, 60 min测定其吸收度。结果见表4。结果表明，本方法稳定性良好。
       表3  供试品重复性实验结果（略）
       表4  稳定性实验结果（略）
       结果表明：样品溶液的A值在45 min内RSD=2.08%，显色基本稳定。但在60 min内RSD=5.64% ,提示测定时间应控制在45 min内。
       2.8  加样回收率实验取已知含量络石藤样品6份, 每份约0.2 g, 精密称定,按2.6项下重复性实验平均含量测定样品含量。每3份分别按0.8∶1, 1∶1加入芦丁对照品, 按2. 1，2. 4项下方法操作,测定各总黄酮含量, 测得加样回收率。结果见表5。结果表明，本方法具有良好的加样回收率。
       2.9  含量测定分别精密量取样品溶液3 ml 5份，按2. 4项下方法从“分别置25 ml容量瓶中”开始操作，测定吸收度，以标准曲线计算得到各总黄酮含量。结果见表6。
       表5  样品加样回收实验结果（略）
       表6  含量测定实验结果（略）
       　　3  讨论
       本实验采用紫外分光光度法测定络石藤中总黄酮的含量，精密度、稳定性、重复性良好,加样回收率合格，为络石藤中总黄酮的含量测定提供了一种简便可行的方法, 为络石藤的质量控制提供了评价手段。 稳定性实验表明, 紫外分光光度法测定络石藤中总黄酮的含量，样品溶液的A值在45 min内RSD=2.08%，显色基本稳定。但在60 min内RSD=5.64% ,提示测定时间应控制在45 min内。
       　　参考文献：
       ［1］  西部三省，韩英梅. 络石藤中的木脂素类成分及其生物活性［J］.中国民族民间医药杂志，2001，48:1.
       ［2］  西部三省，韩英梅. 络石藤化学成分及其抗癌活性［J］.国外医药・植物药分册，2002，17（2）:57.
       ［3］  国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社,2000:247.
       (华中科技大学同济医学院药学院，湖北 武汉  430030)